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Imagem de molécula única da mobilidade lateral e atividade do canal iônico em bicamadas lipídicas usando microscopia de fluorescência por reflexão interna total (TIRF)
JoVE Journal
Biochemie
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JoVE Journal Biochemie
Single-Molecule Imaging of Lateral Mobility and Ion Channel Activity in Lipid Bilayers using Total Internal Reflection Fluorescence (TIRF) Microscopy

Imagem de molécula única da mobilidade lateral e atividade do canal iônico em bicamadas lipídicas usando microscopia de fluorescência por reflexão interna total (TIRF)

DOI:

08:55 min

February 17, 2023

,

Kapitel

  • 00:05Introduction
  • 00:43Preparation of Lipids and Agarose Hydrogel
  • 01:33PMMA Chamber Assembly and Lipid Monolayer Formation
  • 03:06Preparation of Lipid-Coated Aqueous Droplets in Hexadecane/Silicone Oil Solution
  • 04:17Preparation and Imaging of Single Ion Channels in DIB Membranes
  • 06:49Results: Isolation of TOM-CC and Correlation of Channel Activity with Lateral Mobility of TOM-CC
  • 08:18Conclusion

Summary

Automatische Übersetzung

Este protocolo descreve como usar a microscopia TIRF para rastrear canais iônicos individuais e determinar sua atividade em membranas lipídicas suportadas, definindo assim a interação entre o movimento da membrana lateral e a função do canal. Ele descreve como preparar as membranas, registrar os dados e analisar os resultados.

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