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Generación de organoides retinianos a partir de células madre pluripotentes sanas y específicas de la enfermedad retiniana inducida por humanos
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Generation of Retinal Organoids from Healthy and Retinal Disease-Specific Human-Induced Pluripotent Stem Cells
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Generación de organoides retinianos a partir de células madre pluripotentes sanas y específicas de la enfermedad retiniana inducida por humanos

DOI:
10.3791/64509-v

•

09:47 min

•

December 09, 2022

•

, , , , ,
1Centre for Ocular Regeneration, Prof. Brien Holden Eye Research Centre,LV Prasad Eye Institute, 2Manipal Academy of Higher Education, 3Schepens Eye Research Institute, Massachusetts Eye and Ear, Harvard Medical School

Kapitel

  • 00:05Introduction
  • 01:19Passaging and Plating of hiPSCs to Initiate Retinal Lineage Differentiation
  • 02:40Differentiation of hiPSCs into Eye Fields and Retinal Lineage
  • 04:38Harvesting of Retinal Organoids
  • 06:41Results: Characterization of Retinal Organoids and RPE Cells Derived From Normal and RB1-/- Mutant iPSCs
  • 09:06Conclusion

Summary

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Este protocolo describe un método eficiente para diferenciar las hiPSC en grupos de campo ocular y generar organoides neurorretinianos utilizando condiciones de cultivo simplificadas que involucran sistemas de cultivo adherentes y en suspensión. Otros tipos de células oculares, como el EPR y el epitelio corneal, también se pueden aislar de campos oculares maduros en cultivos de retina.

Tags

Retinal OrganoidsHuman Induced Pluripotent Stem CellsRetinal DegenerationRetinal Pigment EpitheliumIn Vitro ModelsCell-based TherapiesEye DevelopmentInherited Retinal DiseasesDifferentiationAdherent CultureSuspension CultureRetinal CupsSpatial PositioningMorphological FeaturesCell DissociationIPSC CultureDifferentiation Induction MediumBFGFNoggin

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