نقدم هنا بروتوكولا لتطوير نماذج الفئران المعدلة وراثيا باستخدام الخلايا الجذعية الجنينية ، خاصة بالنسبة لضربات الحمض النووي الكبيرة (KI). تم ضبط هذا البروتوكول باستخدام تحرير جينوم CRISPR / Cas9 ، مما أدى إلى تحسين كفاءة KI بشكل كبير مقارنة بطريقة استهداف الحمض النووي الخطي التقليدية بوساطة إعادة التركيب المتماثل.