Journal
/
Biochemie
/
포유동물 세포 용해물에서 E3 유비퀴틴-리가아제에 의한 기질 유비퀴틸화의 평가
JoVE Journal
Biochemie
Zum Anzeigen dieser Inhalte ist ein JoVE-Abonnement erforderlich.  Melden Sie sich an oder starten Sie Ihre kostenlose Testversion.
JoVE Journal Biochemie
Evaluation of Substrate Ubiquitylation by E3 Ubiquitin-ligase in Mammalian Cell Lysates
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

포유동물 세포 용해물에서 E3 유비퀴틴-리가아제에 의한 기질 유비퀴틸화의 평가

DOI:
10.3791/63561-v

•

09:47 min

•

May 10, 2022

•

, , ,
1Department of Genetic and Evolution,Federal University of São Carlos, 2Department of Biochemistry and Immunology, Faculty of Medicine of Ribeirão Preto,University of São Paulo

Kapitel

  • 00:05Introduction
  • 01:08Cell Culture
  • 02:33Cell Transfection
  • 03:41Cell Lysis and Immunoprecipitation
  • 07:40Results: Specific Polyubiquitylation of UXT-V2-HA Mediated by Fbxo7
  • 09:06Conclusion

Summary

Automatische Übersetzung

Automatische Übersetzung

우리는 포유동물 세포에서 특정 기질 및 E3 유비퀴틴 리가아제의 유비퀴틸화 검정을 위한 상세한 프로토콜을 제공한다. HEK293T 세포주는 단백질 과발현을 위해 사용되었고, 폴리유비퀴틸화된 기질은 면역침전에 의해 세포 용해물로부터 정제되고, SDS-PAGE에서 분해되었다. 면역블롯팅은 이러한 번역 후 변형을 시각화하기 위해 사용되었다.

Tags

Keyword Extraction: Substrate UbiquitylationE3 LigaseMammalian Cell LysatesImmunoprecipitation AssayWestern BlotHuman DiseasesCancerNeurological DisordersE3 Ligase DysregulationHEK293T Cell LineDulbecco’s Modified Eagles MediumFetal Bovine SerumPenicillinStreptomycinL-glutamineTrypsin EDTAPolyethyleneimineOpti-MEM 1 Reduced Serum MediumTransient Transfections

Article

Embed

ZUR WIEDERGABELISTE HINZUFÜGEN

Usage Statistics

Verwandte Videos

check_url/de/63561?article_type=v

리파제 및 포스 후보자에 대한 기질 특이성을 정의
check_url/de/63561?article_type=v

Rab10 인산화를 평가하여 파킨슨병 관련 LRRK2 키나아제 경로를 심문하기 위한 인간 말초 혈액 호중구 격리
check_url/de/63561?article_type=v

중재 Rad51 DNA 물가 교환 반응의 실시간 관찰
check_url/de/63561?article_type=v

공부 하는 단백질 키 니 아 제 RNA 포유류 세포 주기 동안 활성의 RNA 인터
check_url/de/63561?article_type=v

낮은 중간 처리량에서 배양 포유류 세포에서 세포 성장 및 생존에 영향을 미치는 화합물을 식별하는 전략
check_url/de/63561?article_type=v

포유류 세포에서 세포내 아연 풀을 측정 하는 원자 흡 광도 분광학
check_url/de/63561?article_type=v

아밀로이드 피브릴스뇌 미토콘드리아의 상호 작용 및 막 관과화
check_url/de/63561?article_type=v

시험관 내 링 타입 E3 유비퀴틴 리가제의 기능적 특성화
check_url/de/63561?article_type=v

대사 라벨링 및 얇은 층 크로마토그래피에 의한 사카로미세스 세레시아의 중립 지질 합성 분석
check_url/de/63561?article_type=v

포유류 세포에서 내구 재활용을 조사하기 위한 밀도 그라데이션 초원심 분리

Read Article