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Analyse der SAMHD1-Restriktion durch Durchflusszytometrie in humanen myeloischen U937-Zellen
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JoVE Journal Immunologie und Infektion
Analysis of SAMHD1 Restriction by Flow Cytometry in Human Myeloid U937 Cells
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Analyse der SAMHD1-Restriktion durch Durchflusszytometrie in humanen myeloischen U937-Zellen

DOI:
10.3791/62502-v

•

09:43 min

•

June 13, 2021

•

, , ,
1Retrovirus-Host Interactions Laboratory,The Francis Crick Institute, 2Retroviral Replication Laboratory,The Francis Crick Institute, 3Sidney Sussex College, Department of Medicine,University of Cambridge

Kapitel

  • 00:05Introduction
  • 00:35Flow Cytometry Analysis
  • 04:18Data Analysis
  • 07:50Results: Analysis of the Restriction Ratio in the Optimal and Suboptimal Data
  • 09:15Conclusion

Summary

Automatische Übersetzung

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Hier wird eine etablierte Methode beschrieben, um das Ausmaß der HIV-1-Restriktion durch das zelluläre hemmende Protein SAMHD1 zu bestimmen. Humane myeloische U937-Zellen werden mit einem SAMHD1-Expressionsvektor transduziert, der YFP co-exprimiert, differenziert und dann mit HIV-RFP herausgefordert wird. Der Grad der Einschränkung wird durch Durchflusszytometrie-Analyse bestimmt.

Tags

SAMHD1Flow CytometryU937 CellsHIV InfectionMacrophagesCellular FactorsMulticolor Flow CytometryCytometerFlow RateForward ScatterSide ScatterYFPRFPCompensation Controls

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