Zum Anzeigen dieser Inhalte ist ein JoVE-Abonnement erforderlich. Melden Sie sich an oder starten Sie Ihre kostenlose Testversion.
Kapitel
- 00:04Introduction
- 01:24Identify Potential Genetic Interactions for Screening
- 02:35Design the Cloning Strategy to Clone SIR2 into the pRS315 Vector
- 05:46Transform the Vector into atg1△ and Wild Type Yeast Strains
- 07:32Determine the Chronological Life Span to Test for Shortened CLS Phenotype Suppression
- 08:13Results: Chronological Lifespan of atg1△+pRS315-SIR2
- 10:07Conclusion
Här är ett protokoll för att identifiera genetiska interaktioner genom en ökad kopia nummer suppressor skärm i Saccharomyces cerevisiae. Denna metod gör det möjligt för forskare att identifiera, klon, och testa suppressors i kortlivade jäst mutanter. Vi testar effekten av kopian antalet ökning av SIR2 på livslängd i en autofagi null mutant.
