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Introduction de mutations ponctuelles dans des cellules souches pluripotentes humaines à l’aide d’une édition transparente du génome
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Introducing Point Mutations into Human Pluripotent Stem Cells Using Seamless Genome Editing
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Introduction de mutations ponctuelles dans des cellules souches pluripotentes humaines à l’aide d’une édition transparente du génome

DOI:
10.3791/61152-v

•

09:03 min

•

May 10, 2020

•

, ,
1MRC Centre for Regenerative Medicine,University of Edinburgh

Kapitel

  • 00:05Introduction
  • 00:40Gene Editing of Human Pluripotent Stem Cells
  • 06:57Results: Genetic Editing in Human Pluripotent Stem Cells
  • 08:06Conclusion

Summary

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Ici, nous décrivons une méthode détaillée d’édition de gènes transparente dans des cellules souches pluripotentes humaines en utilisant un plasmide donneur à base de piggyBac et le mutant Cas9 nickase. Deux mutations ponctuelles ont été introduites dans l’exon 8 du locus du facteur nucléaire 4 alpha des hépatocytes (HNF4α) dans les cellules souches embryonnaires humaines (CSEh).

Tags

Human Pluripotent Stem CellsGenome EditingCRISPR-Cas9Seamless Genome EditingTargeted Gene InsertionLaminin 521MTeSR1 MediumCell DissociationNucleofectionSingle Guide RNATargeting Vector

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