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Produzione di particelle pseudotipizzate per studiare la patogenicità coronavirus in un ambiente di livello 2 di biosicurezza
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1Department of Microbiology and Immunology, College of Veterinary Medicine,Cornell University, 2INRA, Virologie et Immunologie Moléculaires, 3Robert Frederick Smith School of Chemical and Biomolecular Engineering,Cornell University, 4Department of Microbiology, College of Agricultural and Life Sciences,Cornell University, 5Horae Gene Therapy Center,University of Massachusetts Medical School
Kapitel
- 00:04Titel
- 00:41Cell Seeding for Pseudotyped Particle Production
- 02:05Three-plasmid Co-transfection
- 03:53Pseudotyped Particles Collection
- 04:46Pseudotyped Particle Infection
- 05:54Infectivity Quantification by Luciferase Assay Readout
- 07:04Results: Infectivity Assays of SARS-CoV S and MERS-CoV S Pseudotyped Particles
- 08:02Conclusion
Qui, presentiamo un protocollo per generare particelle pseudotipizzate in un ambiente di BSL-2 che incorporano la proteina spike della sindrome respiratoria Medio Oriente di virus ad alta patogenicità e coronavirus della sindrome respiratoria acuta grave. Queste particelle pseudotipizzate contengono un gene del reporter di luciferase che permette la quantificazione dell'entrata del virus in cellule bersaglio.
