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Baseado em RNA reprogramação de fibroblastos humanos primários em células-tronco pluripotentes induzidas
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JoVE Journal Entwicklungsbiologie
RNA-based Reprogramming of Human Primary Fibroblasts into Induced Pluripotent Stem Cells

Baseado em RNA reprogramação de fibroblastos humanos primários em células-tronco pluripotentes induzidas

DOI:
10.3791/58687-v

•

11:38 min

•

November 26, 2018

•

, , ,
1Department of Dermatology,University of Colorado School of Medicine, Anschutz Medical Campus, 2Charles C. Gates Center for Regenerative Medicine,University of Colorado School of Medicine, Anschutz Medical Campus, 3Stem Cell Biobank and Disease Modeling Core,University of Colorado School of Medicine, Anschutz Medical Campus

Kapitel

  • 00:04Titel
  • 00:45Reagents Preparation
  • 02:01Plating Fibroblasts for Reprogramming: Day 0
  • 05:09Initiation of Reprogramming: Day 1
  • 09:28Results: Efficient Reprogramming of Human Primary Fibroblasts into iPSCs
  • 11:16Conclusion

Summary

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Aqui nós descrevemos um método clinicamente relevante, alta eficiência, livre de alimentador para reprogramar fibroblastos humanos primários em células-tronco pluripotentes induzidas usando modificados mRNAs codificação fatores reprogramação e imita o microRNA madura-367/302. Também está incluídos métodos para avaliar a eficiência de reprogramação, expanda iPSC clonal colônias e confirmar a expressão do marcador pluripotência TRA-1-60.

Tags

RNA-based ReprogrammingInduced Pluripotent Stem CellsIPSCsPrimary FibroblastsTransfection EfficiencyPH AdjustmentLaminin 521Fibroblast Expansion MediumPlating MediumFGFB18R

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