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Geração de vetores recombinantes Herpesvirus aviária com CRISPR/Cas9 Gene edição
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JoVE Journal Immunologie und Infektion
Generating Recombinant Avian Herpesvirus Vectors with CRISPR/Cas9 Gene Editing

Geração de vetores recombinantes Herpesvirus aviária com CRISPR/Cas9 Gene edição

DOI:
10.3791/58193-v

•

12:21 min

•

January 07, 2019

•

, , , , , , , ,
1The Pirbright Institute & UK-China Centre of Excellence for Research on Avian Diseases, 2Binzhou Animal Science and Veterinary Medicine Academy & UK-China Centre of Excellence for Research on Avian Diseases

Kapitel

  • 00:04Titel
  • 00:53CRISPR/Cas9-mediated Knock-in: Transfection and Infection
  • 02:14Harvesting and Purification of the HVT Recombinant Virus
  • 05:38Excision of the Fluorescent Reporter Gene via the Cre-lox System
  • 06:23Plaque Purification
  • 07:31Verification of the Recombinant HVT
  • 09:31Stability of the Recombinant Virus
  • 10:36Results: Analysis of the Generated Recombinant Avian Herpesvirus Vectors
  • 11:38Conclusion

Summary

Automatische Übersetzung

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Herpesvírus de perus (HVT) é amplamente utilizado como uma plataforma de vetor para a geração de vacinas recombinantes contra um número das doenças aviárias. Este artigo descreve uma abordagem simples e rápida para a geração de vacinas recombinantes HVT-vectored, usando um sistema de Cre-Lox e integrado NHEJ-CRISPR/Cas9.

Tags

CRISPR/Cas9Recombinant Avian HerpesvirusViral AntigensHVT GenomeRecombinant VaccinesGFP Expression CassetteCre-LoxP SystemCell SortingChick Embryo FibroblastsTransfectionHVT Virus StockPlaque Forming UnitsTrypsin-EDTACell SuspensionCell DensityCell SorterGFP-expressing Cells

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