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Einzellige Quantifizierung der mRNA und Oberfläche Protein-Expression in Simian Immunodeficiency Virus-infizierten CD4+ T Zellen isoliert von Rhesus-Makaken
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JoVE Journal Immunologie und Infektion
Single-cell Quantitation of mRNA and Surface Protein Expression in Simian Immunodeficiency Virus-infected CD4+ T Cells Isolated from Rhesus macaques
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Einzellige Quantifizierung der mRNA und Oberfläche Protein-Expression in Simian Immunodeficiency Virus-infizierten CD4+ T Zellen isoliert von Rhesus-Makaken

DOI:
10.3791/57776-v

•

13:13 min

•

September 25, 2018

•

, , , ,
1US Military HIV Research Program, Henry M. Jackson Foundation,Walter Reed Army Institute of Research, 2Vaccine Research Center, NIAID,NIH

Kapitel

  • 00:04Titel
  • 00:46Gene Expression Assay Preparation and Surface Staining of Viable Cells
  • 03:18Prepare Cell Collection Plates, Perform FACS Sort, and Generate cDNA
  • 05:17Multiplex qPCR on the Biomark Platform
  • 11:26Results: Single-cell Quantitation of mRNA and Surface Protein Expression
  • 12:56Conclusion

Summary

Automatische Übersetzung

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Beschrieben ist eine Methodik, die Expression von Genen 96 quantitate und 18 Oberflächenproteine von einzelnen Zellen Ex Vivo, ermöglicht die Identifizierung von differenziell ausgedrückt, Genen und Proteinen in Virus-infizierten Zellen im Verhältnis zu nicht infizierten Zellen. Wir wenden das Konzept Studie SIV-infizierten CD4+ T Zellen isoliert von Rhesus-Makaken.

Tags

Keywords: Single-cell QuantitationMRNASurface ProteinSimian Immunodeficiency VirusCD4+ T CellsRhesus MacaquesHost-pathogen InteractionsCell SortingFlow CytometryGene Expression AssaysSurface StainingCell SuspensionCell ViabilityAntibody CocktailCell Strainer

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