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Evaluation of Intracellular Location of Reactive Oxygen Species in Solea Senegalensis Spermatozoa
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Evaluación de ubicación intracelular de especies reactivas de oxígeno en espermatozoides de Solea Senegalensis

DOI:
10.3791/55323-v

•

10:24 min

•

March 11, 2018

•

,
1Department of Molecular Biology,University of León, 2INDEGSAL,University of León, 3Planta de Cultivos el Bocal,Spanish Institute of Oceanography (IEO)

Kapitel

  • 00:00Titel
  • 01:32Preparatory work before the experiment
  • 02:58Sample preparation before fluorochromes incubation
  • 04:40Fluorochromes incubation
  • 05:33Sample preparation for confocal microscopy
  • 05:51Confocal setting up prior to the experiment
  • 06:49Acquisition of images
  • 07:49Ergebnisse
  • 08:24Creating a 3D image video
  • 09:53Conclusions

Summary

Automatische Übersetzung

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Este protocolo describe una metodología detallada para detectar la localización de2 H2O en Solea senegalensis espermatozoides con un fluorocromo sensible DCFH-DA para ROS, una mancha de mitocondrias vivo para las mitocondrias y DAPI para núcleos visualización, respectivamente. El protocolo está diseñado para ser realizado dentro de 2 h con espermatozoides frescos o descongelados.

Tags

Reactive Oxygen SpeciesSpermatozoaSolea SenegalensisConfocal MicroscopyFluorochromesMitochondriaDAPI2′7′-dichlorofluorescein DiacetateOxidative StressLipid PeroxidationApoptosisCryopreservation

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