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Quantitative High-throughput Single-cell Zytotoxizitätstest für T-Zellen
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Immunologie und Infektion
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JoVE Journal Immunologie und Infektion
Quantitative High-throughput Single-cell Cytotoxicity Assay For T Cells

Quantitative High-throughput Single-cell Zytotoxizitätstest für T-Zellen

DOI:

09:28 min

February 02, 2013

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Kapitel

  • 00:05Titel
  • 01:32Fabrication of Arrays of Nanowells in PDMS
  • 02:14Target Cell (T) Labeling
  • 02:53Effector (E) Cell Labeling
  • 03:26Separation of Live and Dead Cells by Ficoll Density Gradient
  • 05:23Cell Loading onto Nanowell Array
  • 06:51Imaging
  • 07:58Results: A High-throughput Cytolytic Assay
  • 09:03Conclusion

Summary

Automatische Übersetzung

Wir beschreiben ein Single-Cell-Assay mit hohem Durchsatz, die Zytotoxizität von T-Zellen zu messen, wenn mit Tumor Zielzellen inkubiert. Dieses Verfahren verwendet eine dichte, elastomeren Anordnung von Sub-Nanoliter-Wells (~ 100.000 Wells / Array) räumlich zu begrenzen, die T-Zellen und Zielzellen in definierten Verhältnissen und mit Fluoreszenzmikroskopie gekoppelt Effektor-Target Konjugation und anschließender Apoptose überwachen.

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