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Techniques for Imaging Ca 2 + Signaling in menschlichen Spermien
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Techniques for Imaging Ca2+ Signaling in Human Sperm
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Techniques for Imaging Ca 2 + Signaling in menschlichen Spermien

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•

07:38 min

•

June 16, 2010

DOI:

10.3791/1996-v

DOI:
10.3791/1996-v

•

07:38 min
June 16, 2010

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1School of Biosciences,University of Birmingham, 2School of Medicine,University of Birmingham, 3Centre for Human Reproductive Science,Birmingham Women’s Hospital

Summary

Automatically generated

Stimulus-evozierte [Ca<sup> 2 +</sup>] I-Signale der einzelnen menschlichen Spermien beurteilt. Bewegliche Zellen mit Ca geladen<sup> 2 +</sup> Fluoreszenzfarbstoff (AM-Ester-Methode) und immobilisiert in einem perfundierbaren Kammer. Die Zellen werden durch Zeitraffer-Fluoreszenzmikroskopie abgebildet und stimuliert über die Perfusion Medium. Responses von einzelnen Zellen (oder Regionen) sind offline analysiert mit Hilfe von Excel.

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Fluorescence MicroscopyCa2+ SignalingHuman SpermFluorescent DyesLoading MethodPhysiological StimulationCapacitating ConditionsAM EsterCytoplasmVisible Wavelength DyesRatiometric RecordingAdvantages And DisadvantagesImaging ChamberPoly-D-lysine Coated CoverslipPerfusion ApparatusTime-lapse AcquisitionRegions Of InterestData Normalization

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Nash, K., Lefievre, L., Peralta-Arias, R., Morris, J., Morales-Garcia, A., Connolly, T., Costello, S., Kirkman-Brown, J. C., Publicover, S. J. Techniques for Imaging Ca2+ Signaling in Human Sperm. J. Vis. Exp. (40), e1996, doi:10.3791/1996 (2010).

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