Summary

Établissement de l’infarctus aigu des pontines chez les rats par stimulation électrique

Published: August 27, 2020
doi:

Summary

Présenté ici est un protocole pour établir l’infarctus aigu de pontine dans un modèle de rat par stimulation électrique avec une seule impulsion.

Abstract

L’infarctus pontine est le sous-type de trait le plus commun dans la circulation postérieure, alors qu’il manque un modèle de rongeur imitant l’infarctus de pontine. Fourni ici est un protocole pour établir avec succès un modèle de rat de l’infarctus aigu pontine. Des rats pesant environ 250 g sont utilisés, et une sonde avec une gaine isolée est injectée dans les pons à l’aide d’un appareil stéréotaxique. Une lésion est produite par la stimulation électrique avec une seule impulsion. Le score de Longa, le score de Berderson, et le test d’équilibre de faisceau sont utilisés pour évaluer des déficits neurologiques. En outre, le test somatosensoriel adhésif-enlèvement est utilisé pour déterminer la fonction sensorimotrice, et le test de placement des membres est utilisé pour évaluer la proprioception. Les balayages de MRI sont alors utilisés pour évaluer l’infarctus in vivo, et la coloration de TTC est employée pour confirmer l’infarctus in vitro. Ici, un infarctus réussi est identifié qui est situé dans la base antérolatérale des pons rostral. En conclusion, une nouvelle méthode est décrite pour établir un modèle aigu de rat d’infarctus de pontine.

Introduction

Depuis les années 1980, le modèle d’occlusion cérébrale moyenne (MCAO) induit par les filaments de silicone a été largement utilisé dans la recherche de base sur les accidents vasculaires cérébraux1. D’autres méthodes (c.-à-d. suturer une branche du MCA2 et l’infarctus focal induit par photochimiquement) ont également été utilisées. Ces modèles ont été appelés modèles d’AVC basés sur le MCA et ont grandement contribué aux investigations des mécanismes pathophysiologiques sous-jacents à l’AVC et aux thérapies potentielles. Bien qu’il y ait des limites de ces modèles expérimentaux3,4, ces méthodes ont été utilisées de nombreux laboratoires5,6. Les modèles d’AVC basés sur le MCA représentent un accident vasculaire cérébral dans la circulation antérieure; cependant, peu de rapports ont étudié des modèles imitant l’AVC dans la circulation postérieure7.

Il y a des différences significatives entre l’étiologie, les mécanismes, la manifestation clinique, et le pronostic entre les courses antérieures et postérieures de circulation8. Par conséquent, les résultats dérivés des modèles antérieurs de course de circulation ne peuvent pas être appliqués à la course de circulation postérieure. Par exemple, la fenêtre de temps de reperfusion pour la circulation antérieure a été étendue à 6 h, avec une petite partie des études s’étendant à 24 h sur la base des résultats d’imagerie9. Cependant, la fenêtre de temps pour la circulation postérieure peut être plus longue que 24 h, selon les rapports précédents10 et nos propres expériences cliniques. Cette fenêtre de temps de reperfusion allongée doit être étudiée et confirmée plus loin dans les modèles expérimentaux.

En ce qui concerne les accidents vasculaires cérébraux postérieurs, l’infarctus pontine est le sous-type le plus courant, représentant 7% de tous les cas d’AVC ischémique11,12. Selon la topographie de l’infarctus, les infarctus pontines sont divisés en infarctus pontines isolés et non isolés13. Les infarctus isolés de pontine sont classés en trois types basés sur les mécanismes sous-jacents : la grande maladie d’artère (LAD), la maladie de branche basilaire d’artère (BABD), et la petite maladie d’artère (SAD). La connaissance des mécanismes, de la manifestation et du pronostic de l’infarctus pontine a été dérivée des investigations cliniques des cas14. Cependant, un modèle de rongeur imitant l’infarctus de pontine a été moins étudié.

Dans des études précédentes, la lésion diffuse de tegmentum de tronc cérébral impliquant les pons a été explorée7. Un groupe a tenté de créer un modèle d’infarctus pontine par ligature de l’artère basilaire (BA)15. Un autre groupe a utilisé une suture monofilament en nylon 10-0 pour lier sélectivement quatre points de la BA proximale sélectivement16. Ce modèle imite LAD, mais la plupart des infarctus pontines résultent de BABD et SAD. En outre, la ligature sélective de la BA est une chirurgie compliquée et a un taux de mortalité élevé.

Fourni ici est un protocole détaillé pour un modèle de rat facile à réaliser, facilement reproduit, et réussi de l’infarctus aigu pontine par stimulation électrique.

Protocol

Le protocole a été examiné et approuvé par le Comité des soins et de l’utilisation des animaux de l’institution du deuxième hôpital affilié de l’Université médicale de Guangzhou, un établissement accrédité par l’AAALACi. Les rats ont été fournis par le Centre animal de l’Université médicale du Sud. 1. Animal Utiliser des rats mâles adultes Sprague-Dawley pesant 250 ± 10 g. Lors du transport, loger les rats pendant au moins 1 semaine avant la chi…

Representative Results

Six animaux ont été soumis au protocole de chirurgie décrit ci-dessus. Le groupe témoin, tel qu’indiqué dans la figure 4, était composé de six rats. Les tranches cérébrales indiquées dans la figure 4 étaient dérivées d’un rat par groupe. L’IRM a montré que l’infarctus était situé à la base des pons (figure 4A). Comme la sonde a été injectée de 2 mm à gauche de la ligne médian…

Discussion

La présente étude fournit un protocole pour générer un modèle aigu de rat d’infarctus de pontine. Ce modèle peut être utilisé pour la recherche sur le pronostic et la réadaptation (y compris la douleur chronique post-AVC) chez les patients atteints d’avc pontine.

Il existe plusieurs points forts de cette méthode. Tout d’abord, il fournit un modèle de rat de l’infarctus aigu pontine pour les études futures. Comme mentionné ci-dessus, l’infarctus pontine est un sous-type d…

Offenlegungen

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Cette étude a été soutenue financièrement par la National Science Foundation of China (81471181 et 81870933) à Y. Jiang et la National Science Foundation of China (No. 81601011), Natural Science Foundation of Jiangsu Province (No. BK20160345) à J. Zhu et par le programme scientifique de la Commission municipale de la santé de Guangzhou (20191A011083) à Z. Qiu.

Materials

4-0 sucture Shanghai Jinzhong Surgical instruments
Adhesive tape Shanghai Jinzhong Surgical instruments
Animal anesthesia system RWD Wear mask when using the system
Bone cement Shanghai Jinzhong Surgical instrument
Cured clamp Shanghai Jinzhong Surgical instrument
General tissue scissors Shanghai Jinzhong Surgical instrument
IndoPhors Guoyao of China Sterilization
Isoflurane RWD 217181101
Lesion Making Device Shanghai Yuyan Making a lesion
MRI system Bruker Biospin Confirmation of infarction in vivo
Needle holder Shanghai Jinzhong Surgical instrument
Penicilin Guoyao of China Infection Prevention
Probe Anke Need some modification
Q-tips Shanghai Jinzhong Surgical instrument
Shearing scissors Shanghai Jinzhong Surgical instrument
Stereotaxic apparatus RWD
Suture needle Shanghai Jinzhong Surgical instrument
Tissue holding forcepts Shanghai Jinzhong Surgical instrument
TTC Sigma-Aldrich BCBW5177 For infarction confirmation in vitro

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Diesen Artikel zitieren
Luo, M., Tang, X., Zhu, J., Qiu, Z., Jiang, Y. Establishment of Acute Pontine Infarction in Rats by Electrical Stimulation. J. Vis. Exp. (162), e60783, doi:10.3791/60783 (2020).

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