Microhemorragias cerebrales aguda inducida por la inyección de lipopolisacáridos en ratas
Summary
Presentamos un protocolo para inducir y detectar CMHs causadas por la inyección de LPS en ratas Sprague-Dawley, que puede ser utilizaron en el futuro las investigaciones de la investigación en la patogenesia de CMHs.
Abstract
Microhemorragias cerebrales (CMHs) son comunes en pacientes mayores y están correlacionados con varios trastornos neuropsiquiátricos. La etiología de CMHs es compleja, y neuroinflamación se observa a menudo como una co-ocurrencia. Aquí, describimos una aguda inducido por la inyección de lipopolisacáridos (LPS), así como un método para detectar inyección de CMHs. LPS sistémico del modelo de la rata de CMHs es relativamente simple, económico y rentable. Una ventaja importante de la inyección de LPS es su estabilidad para inducir inflamación. CMHs causadas por la inyección de LPS se podían detectar por observación bruto, hematoxilina y coloración de eosina (HE), Perl prusiano tinción, etiquetado doble de azul de Evans (EB) y la tecnología de imágenes (MRI-SWI) proyección de imagen de resonancia magnética-susceptibilidad ponderada. Por último, otros métodos de desarrollo de modelos animales de CMHs, incluyendo sus ventajas y desventajas, también se discuten en este informe.
Introduction
Microhemorragias cerebrales clásicas (CMHs) consulte perivascular diminutos depósitos de productos de degradación de la sangre como hemosiderina de glóbulos rojos en el cerebro1. Según el estudio de exploración de Rotterdam, CMHs podían encontrarse en casi el 17,8% de las personas de 60-69 años de edad y 38,3% en los 80 años2. La prevalencia de CMHs en los ancianos es relativamente alta, y una correlación entre la acumulación de CMHs y disfunción cognitiva y neuropsiquiátrica ha establecido3,4. De CMHs en varios modelos animales se han divulgado recientemente, incluyendo modelos de roedores inducidos por tipo colagenasa IV de inyección estereotáctica5, transgénicos APP6, β-N-methylamino-L-alanina exposición7y8de hipertensión, con CMHs inducidas por inflamación sistémica como una de las opciones más bien aceptadas. Fisher et al. 9 utilizado primero LPS derivados de Salmonella typhimurium para desarrollar un modelo de ratón agudo de CMHs. Posteriormente, el mismo grupo informó el desarrollo de un modelo de ratón de CMHs agudo utilizando el mismo enfoque2.
LPS se considera como un estímulo inflamatorio estandarizado mediante inyección intraperitoneal. Estudios previos han confirmado que la inyección de LPS puede causar neuroinflamación tal y como refleja grandes cantidades de microglia y activación de astrositos en animales modelos de2,10. Además, una correlación positiva entre la activación de la activación de la neuroinflamación y el número de CMHs ha sido establecido2,10. Basado en estos estudios previos, nos llevó a desarrollar un modelo de rata de CMHs por inyección intraperitoneal de LPS.
Los avances en la detección de tecnologías han dado lugar a un aumento en el número de trabajos de CMHs. Más ampliamente reconocieron que los métodos de detección de CMHs incluyen la detección de glóbulos rojos por hematoxilina y eosina (HE) tinción, detección de hierro férrico por9, la coloración de azul de Prusia azul de detección de Evans deposición (EB) por inmunofluorescencia imágenes y Tesla 7,0 susceptibilidad resonancia magnética ponderada proyección de imagen (MRI-SWI)10. El presente estudio tiene como objetivo desarrollar un método de detección de CMHs.
Protocol
Representative Results
Discussion
Estudios sobre las CMHs han aumentado en los últimos años. Sin embargo, el mecanismo de CMHs sigue siendo confuso, lo que los científicos a establecer modelos animales que simulan esta condición particular. Por ejemplo, Hoffmann et al. desarrollado un modelo de ratón de CMHs inducida por la hipoxia que muestra que CMHs son causadas por hipoxia y alteración de la autorregulación cerebrovascular12. Reuter et al. 5 estableció un modelo de CMHs en rato…
Offenlegungen
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Agradecemos a maestro Jian Feng Lei y sus colegas de Universidad médica de Capital para la orientación durante el MRI. También agradecemos a Jing Zeng desde el Departamento de Neurología, Hospital de Yichang la segunda gente para apoyo técnico.
Materials
| LPS | Sigma-Aldrich | L-2630 | for inflammation induction |
| EB | Sigma-aldrich | E2129 | for EB leakage detection |
| DAPI dying solution | Servicbio | G1012 | count medium for IF |
| Perl’s Prussian staining | Solarbio | G1424 | Kit for Prussian staining |
| HE staining | Solarbio | G1120 | Kit for HE staining |
| chloral hydrate | Sigma-Aldrich | 47335U | For anesthesia |
| phosphate buffer saline (PBS) | Solarbio | P1022 | a kind of buffer solution commonly used in experiment |
| 0.9% saline solution | Hainan DonglianChangfu Pharmaceutical Co., Ltd., China | solution for perfusion | |
| paraformaldehyde | Sigma-Aldrich | 158127 | a kind of solution commonly used for fixation |
| 20% sucrose solution | Solarbio | G2461 | a kind of solution commonly used for fixation |
| 30% sucrose solution | Solarbio | G2460 | a kind of solution commonly used for fixation |
| vet ointment | Solcoseryl eye gel, Bacel, Switzerland | for rat's eyes protection |
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