На основе ламинарного потока Assays расследовать лейкоцита набора на искусственный сосудистый клетки и сторонником тромбоцитов

После травмы, воспаление или инфекция лейкоциты быстро реагировать на возбудителя – или повреждения связанные молекулярные модели (PAMPs, DAMPs), изменения в активированное состояние и выбраться поток крови к местам воспаления и тканей повреждения. Лейкоциты способность взаимодействовать с их клеточном и молекулярном окружающей среды имеет важное значение для их правильной работы как иммунные клетки, как подчеркнул генетических расстройств, таких как дефицит адгезии лейкоцитов¹. Лейкоцитарной адгезии был предметом интенсивных исследований в течение последних десятилетий, и это привело к концепции Каскад адгезии лейкоцитов в начале 1990-х^2,3. Лейкоцитарной адгезии инициируется селектина посредничестве захвата лейкоциты эндотелия, вызывая клеток для пролонгировать поверхности сосудов. Это подвижного позволяет лейкоцитов для проверки эндотелий прыгните мигрирующих подсказки, например, chemokines, которые вызывают активацию интегринов. Впоследствии активированные интегринов посредником привязки эндотелиальных лигандами, результате фирмы лейкоцита ареста. Лейкоциты могут впоследствии подготовиться к extravasate ползать и распространение, перед прорезывать эндотелиальной монослоя и пролетный в основной ткани. Основная концепция канонической лейкоцита Каскад остается практически неизменной с момента ее введения, с некоторые промежуточные шаги добавил⁴. Тем не менее точные молекулярные механизмы и роли многих игроков, участвующих в лейкоцитарной найма не выяснены до настоящего времени, и лейкоцитарной набор остается важным вопросом в области инфекции, воспаления и (авто-) иммунной исследования.

Например во время сосудистый воспалительных заболеваний как атеросклероз, увеличилась лейкоцита вербовки в развитие зубного налета диски судна стены. Нестабильные атеросклеротических бляшек может разрыва, привело к массовым активации тромбоцитов и свертывающей системы и впоследствии окклюзии сосуда⁵. Это может привести к тяжелой сердечно-сосудистые исходы, такие как инфаркт миокарда или инсульт. Кроме того эндотелиальных денудации как она возникает клинически, например после стентирования коронарных артерий, приводит к множество взаимодействий лейкоцитов и тромбоцитов до внутренней стены подвергается сосуд (например, матрица компоненты и гладкой мышечных клеток) и лейкоцитов с тромбоцитов, охватывающих сосудистых повреждений. Эти взаимодействия имеют важное значение для дальнейшего развития этого заболевания как Моноцит тромбоцитов взаимодействия может управлять neointima формирования^6,7. Кроме того тромбоцитов и лейкоцитов взаимодействия при посредничестве Интегрин лейкоцита Mac-1 (α_Mβ₂) и тромбоцитов GPIbα недавно были определены как Роман драйвера тромбоза в мышей⁸.

Учитывая широкую доступность крови человека и животных как источник лейкоцитов и тромбоцитов исследований, и широкий спектр изолированных матрица молекул и увековечен клеточных линий лейкоцитов и сосудистого происхождения, это возможно для имитации лейкоцитов взаимодействие в поток в лаборатории установки, используя специально разработанные потока перфузии камер. Многие варианты были разработаны за последние десятилетия, начиная от вакуум driven самоклеящиеся перфузии камер. Все варианты имеют в общем, которые неподвижной части (например, искусственный сосудистый клетки или матрица белков) собираются в больших герметичным камеру с предварительно определенный канал включение перфузии жидкости над неподвижной части. Кроме того прогресс в технологии формования включена разработка заказных решений на основе силики полимеров⁹. Главным образом определить касательное напряжение характеристики потока перфузии устройство¹⁰вязкости и расхода жидкости перфузии и высота канала. В этой статье мы представляем в vitro метод для изучения основных механизмов адгезии, снижения адгезии и переселение лейкоцитов при венозной и артериальной потока режимах. Преимущество методов, представленные здесь заключается в том, что они могут быть выполнены с использованием общей микроскоп камера подключена флуоресценции и не требуют экспериментаторов обладают высокой технической квалификации. В пробирке можно манипулировать во многих отношениях (например, путем добавления ингибиторы или блокирование антитела) и таким образом является применимым в различных моделях сосудистого воспаления и позволяет исследование адгезии функций белков или Оценка конкретных соединений.