Summary

マウスの記憶・学習の調査のための新規オブジェクト認識テスト

Published: August 30, 2017
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Summary

オブジェクト認識テスト (ORT) は、マウスの記憶・学習を評価するための簡単かつ効率的なアッセイです。方法論を説明します。

Abstract

オブジェクト認識テスト (ORT) は、マウスの記憶・学習の様々 な面の調査のための一般的に使用される行動分析です。ORT は比較的単純で、3 日間を完了することができます: 慣れ日、トレーニングの日、およびテストの日。訓練中にマウス、2 同一のオブジェクトを探索できます。テストの日にトレーニング オブジェクトの 1 つが新規オブジェクトに置き換えられます。マウス マウスはよく知られた目的を認識した場合、目新しさの生得的な好みがあるため新規オブジェクトでその時間の大半を過ごすがそれ。この生得の好みのため、正または負の強化あるいは長いトレーニング スケジュールのため必要はありません。さらに、ORT は、多数のアプリケーションの変更もできます。保存期間は短期的なメモリを調べるため短縮または長期記憶をプローブに延長できます。薬理学的介入は、様々 な時代の訓練の後、トレーニング前にまたはリコール前に (すなわち買収、早いか遅い統合、またはリコール) を学習のさまざまな段階を調査するで使用できます。全体的に、ORT はマウス、メモリのための比較的低ストレスかつ効率的なテスト、薬理学的、生物学的または遺伝的操作を伴う神経心理学的変化を検出するために適切です。

Introduction

オブジェクト認識テスト (ORT)、新規オブジェクト認識テスト (NOR), とも呼ばれる、マウスの記憶・学習のさまざまな段階をテストするため比較的高速かつ効率的な手段です。もともと 1988 年に Ennaceur とデラクールによって記述されラット1で主に使用されます。しかし、それ以来、それ正常に適応されている使用マウス2,3,4,5,6,7。テストは、3 つのセッションほどに依存している: 1 つ慣れセッション、1 つのトレーニング セッションと 1 つのテスト セッション。トレーニングは単にテスト セッションでは、新規オブジェクトに以前に探索のオブジェクトの 1 つを置き換える必要があります、2 つの同一のオブジェクトの視覚的探査を含みます。齧歯動物は目新しさの生得的な好みがあるために、よく知られた目的を覚えている齧歯動物は新規オブジェクト7,8,9を探索するより多くの時間を過ごします。

他の齧歯動物のメモリテストの ORT の主な利点は齧歯動物の自然な性癖ノベルティ8を探索するために依存します。したがって、動作をやる気にさせる多数のトレーニング セッションまたは任意の正または負の補強の必要はありません。つまり、ORT ははるかに少ないストレス、その他テスト1011,12,13,14,15を基準にして、大幅に必要です。モリス水迷路やバーンズ迷路まで 1 週間以上かかることがあるなど、一般的に使用されるその他のメモリよりも起動に時間をテストします。その結果、ORT の条件では他の多くの齧歯動物のメモリ テストをテストの生態学的妥当性を増加、人間の認知の調査で使用されるそれらより密接に似ています。同様に、ORT は単純な視覚的リコール タスク、ため正常にも対応しています宣言的記憶2,16 の異なる生物種間側面を評価する人間とヒト以外の霊長類を含む多くの種で使用するため ,17。学習と記憶 (すなわち買収、統合、またはリコール)、(例えば、空間記憶)、メモリの種類を評価したり、異なる保存期間を評価するためのさまざまなフェーズを調べる ORT を簡単に変更することができます最後に、間隔 (すなわち、短期的な長期記憶)。

ORT の汎用性は、無数の研究用プラットフォームを提供します。研究を行うことができますいずれかを破壊またはメモリを強化する薬理学的薬剤の使用します。つながるメカニズムが中断または拡張メモリ6,18,19,基になる神経をほのめかすことができます投薬前に訓練の後、または、テスト前の時間を変化20. 光遺伝学的技術と同様の方法ですることができますこれらの同じ時間の様々 なポイントを見て使用神経活性化/抑制記憶・学習のさまざまな段階に貢献します。ORT はトランスジェニック動物、病変の研究や神経変性モデル、または高齢化研究21,22,23,24,の違いを評価するために適切なも25,26,27,28. 短・長期メモリ26に対するこれらの変更のいずれかを評価するためにトレーニングとテスト、保存間隔として知られている間の時間を変更できます。最終的には、ORT は学習と記憶を遺伝的、薬理学的、神経学的な変化を研究するツールとして使えるか ORT の記憶・学習の基礎を勉強するこれらのツールを使用することができます。

Protocol

ここで実行されたすべてのプロシージャに送信されたと動物ケアの承認し使用委員会と NIH のガイドラインに従って実施した。 1 ですオブジェクトの選択、実験のセットアップ はマウスで簡単に差別されるに十分に異なっている 選択オブジェクト (テクスチャ、図形、色パターンと明るさ、複雑さの類似性があるが。など)どんな可能性を最小限に抑…

Representative Results

ORT の一般的な実験のセットアップを図 2に示します。慣れ日 (T0) マウスが配置されて 5 分 24 時間後空の分野でマウスをチャンバー内に 2 つの同一のオブジェクトで再配置し、10 分程度 (T1) を自由に探索できます。テストの日 (T2) にマウスは、アリーナが 1 つ身近なオブジェクトと 1 つの新規オブジェクトを配置、10 分まで探検することが再び。…

Discussion

ORT は、マウスの記憶・学習の勉強の効率的かつ柔軟な方法です。実験を設定する場合は、結果に影響を与えることができる変数の数を考慮する重要です。代表的な結果の説明、マウスの緊張は探査時間と保持間隔の両方に影響を与えます。探査時間の減少が偏る可能性があります。 またはマスクを絶対差別分析2,3,5,</…

Offenlegungen

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

引用し、著者が、以前公開されてから、国立衛生研究所の精神 (MH088480) の助成金によって行われました。著者は、彼女のかつての師匠、ジェームズ ・ オドンネルそのプロジェクトでの彼のサポートのために感謝したいと思います。この出版物は、国立衛生研究所 (T32 DA007135) からの助成金によってサポートされます。

Materials

Open Field Box Panlab/Harvard Apparatus LE800SC Available in grey, white, or black
ANY-maze Stoelting Co. 60000 Behavior tracking system
EthoVisionXT 12 Noldus Behavior tracking system; requires 3 point tracking
Video Camera Any Video camera should be mounted directly overhead of the apparatus
70% Ethanol  Fisher Scientific BP2818-4 Prior to starting testing and in between trials, each object should be carefully cleaned. The floor and walls of the apparatus should also be cleaned. 

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Lueptow, L. M. Novel Object Recognition Test for the Investigation of Learning and Memory in Mice. J. Vis. Exp. (126), e55718, doi:10.3791/55718 (2017).

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