Prueba de reconocimiento de objeto novedoso para la investigación del aprendizaje y la memoria en ratones
Summary
La prueba de reconocimiento de objeto (ORT) es un ensayo sencillo y eficaz para evaluar el aprendizaje y la memoria en ratones. La metodología se describe a continuación.
Abstract
La prueba de reconocimiento de objeto (ORT) es un ensayo de comportamiento utilizado para la investigación de diversos aspectos del aprendizaje y la memoria en ratones. La ORT es bastante simple y puede completarse en 3 días: día de habituación, jornada de formación y pruebas. Durante el entrenamiento, el ratón está permitido explorar 2 objetos idénticos. En el día del examen, uno de los objetos de formación se sustituye por un nuevo objeto. Porque los ratones tienen una preferencia innata por la novedad, si el ratón reconoce el objeto familiar, pasará la mayor parte de su tiempo en el nuevo objeto. Debido a esta preferencia innata, no hay necesidad de refuerzo positivo o negativo o largos calendarios de formación. Además, también puede modificarse la ORT para numerosas aplicaciones. El intervalo de retención puede ser acortado para examinar la memoria a corto plazo, o alargado para sonda de memoria a largo plazo. Intervención farmacológica puede utilizarse en varias veces antes del entrenamiento, después del entrenamiento o antes de la llamada a investigar diferentes fases del aprendizaje (es decir, adquisición, consolidación temprana o tardía o memoria). En general, la ORT es una prueba relativamente poco estrés, eficiente para la memoria en ratones y es apropiada para la detección de cambios neuropsicológicos tras manipulaciones farmacológicas, biológicas o genéticas.
Introduction
La prueba de reconocimiento de objeto (ORT), también conocido como la prueba del reconocimiento de la novela objeto (ni), es un medio relativamente rápido y eficiente para probar diferentes fases de aprendizaje y memoria en ratones. Originalmente fue descrito por Ennaceur y Delacour en 1988 y utilizado principalmente en ratas1; sin embargo, desde entonces, ha sido exitosamente adaptado para uso en ratones2,3,4,5,6,7. La prueba se basa en tan sólo tres sesiones: sesión de una habituación, un entrenamiento y una prueba de sesión. Formación implica simplemente exploración visual de dos objetos idénticos, mientras que la sesión de la prueba consiste en sustituir uno de los objetos previamente explorados con un objeto nuevo. Porque los roedores tienen una preferencia innata por la novedad, un roedor que recuerda el objeto familiar pasa más tiempo explorando la novela objeto de8,7,9.
La principal ventaja de la ORT sobre otras pruebas de memoria de roedores es que se basa en la propensión natural de los roedores para explorar novedad8. Por lo tanto, no hay numerosas sesiones de entrenamiento o cualquier refuerzo positivo o negativo para motivar el comportamiento. Esto significa que la ORT es mucho menos estresante, con respecto a otras pruebas10,11,12,13,14,15y requiere a la significativamente menos tiempo para ejecutar que comúnmente emplean memoria pruebas, como el laberinto acuático de Morris o el laberinto de Barnes, que puede tardar hasta una semana o más. En consecuencia, las condiciones de la ORT más de cerca se asemejan a los utilizados en el estudio de la cognición humana, incrementar la validez ecológica de la prueba sobre muchas otras pruebas de memoria de roedores. Del mismo modo, porque ORT es una tarea de memoria visual simple, ha sido exitosamente adaptado para uso en numerosas especies, incluyendo seres humanos y primates no humanos, para evaluar diferentes aspectos de entre las especies de la memoria declarativa 2,16 ,17. Por último, la ORT puede modificarse fácilmente para examinar diferentes fases del aprendizaje y la memoria (es decir, adquisición, consolidación o recuperación), para evaluar diferentes tipos de memoria (e.g., memoria espacial), o para evaluar la retención de diferentes intervalos (es decir, a corto plazo memoria a largo plazo vs ).
La versatilidad de la ORT proporciona una plataforma para aplicaciones de investigación innumerables. Estudios pueden hacer uso de agentes farmacológicos para alterar o mejorar la memoria. Variando el tiempo de administración antes o después del entrenamiento o antes de la prueba puede insinúan neural subyacente mecanismos que conducen a interrumpen o mayor memoria6,18,19, 20. de manera similar, la tecnología de optogenetic puede ser utilizado en estos mismo varios puntos de tiempo para mirar la activación/inhibición neural que contribuye a las distintas fases del aprendizaje y la memoria. La tro también es apropiado para evaluar diferencias en animales transgénicos, en los estudios de la lesión, o en modelos neurodegenerativos o en envejecimiento estudios21,22,23,24, 25 , 26 , 27 , 28. el tiempo entre la formación y de prueba, conocido como el intervalo de retención, puede modificarse para evaluar cualquiera de estos cambios en la memoria de corto y largo plazo26. En última instancia, la ORT puede utilizarse como una herramienta para el estudio de cambios farmacológicos, genéticos y neurológicos en el aprendizaje y la memoria, o pueden utilizar estas herramientas para el estudio de la base del aprendizaje y la memoria en la ORT.
Protocol
Representative Results
Discussion
La ORT es un método eficaz y flexible para el estudio de aprendizaje y la memoria en ratones. Cuando se configura un experimento, es importante considerar una serie de variables que pueden afectar el resultado. Como en los resultados representativos, la cepa de ratón afectará tanto intervalo de retención y tiempo de exploración. Una disminución en el tiempo de exploración puede sesgar o máscara resulta en una discriminación absoluta análisis2,3,</s…
Offenlegungen
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Trabajo citado y publicado previamente por el autor fue apoyado por una subvención del Instituto Nacional de Salud Mental (MH088480). El autor desea agradecer a su antiguo mentor, el Dr. James O’Donnell por su apoyo en este proyecto. Esta publicación es apoyada por una subvención del Instituto Nacional de salud (T32 DA007135).
Materials
| Open Field Box | Panlab/Harvard Apparatus | LE800SC | Available in grey, white, or black |
| ANY-maze | Stoelting Co. | 60000 | Behavior tracking system |
| EthoVisionXT 12 | Noldus | Behavior tracking system; requires 3 point tracking | |
| Video Camera | Any | Video camera should be mounted directly overhead of the apparatus | |
| 70% Ethanol | Fisher Scientific | BP2818-4 | Prior to starting testing and in between trials, each object should be carefully cleaned. The floor and walls of the apparatus should also be cleaned. |
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