두와 입체 배아 체에서 마우스 배아 줄기 세포의 레티노 산에 의한 신경 분화 분석

는 ESC는 배반포의 내부 세포 덩어리로부터 유래. 그들이 기원의 유기체의 모든 세포 유형으로 분화 할 수있는 능력을 가지고 즉,이 세포는 만능이다. ESC 체외 분화 발달 경로와 메커니즘을 조사하는 실험적인 시스템으로 폭 넓은 관심이다. 그것은 세포와 조직 기능 장애의 교정을위한 새로운 치료 방법을 테스트 할 수있는 강력하고 유연한 모델 시스템을 제공합니다. 교환 사채는 초기 배 발생 동안 세포 분화의 여러 측면을 요점을 되풀이. 배아 치사가 어려운 배아 결함 ^{(1, 2)의} 셀룰러 기반을 결정하게 될 때 특히 EB를 사용할 수있다. 사채가 매달려 드롭 또는 액체 현탁액 기술 ⁽³⁾ 중 어느 하나를 형성 할 수있다. 전자의 이점은, 따라서 실험 재현성을 용이 일관된 크기 및 밀도 사채를 생성하는 능력이다.

<p c아가씨 = "jove_content는"> 세포 외 기질 (ECM) 접착 단백질과의 상호 작용이 부착 세포의 운동성 및 생존에 영향을 미칠 수있다. 2 차원 배양 시스템에있어서, 피브로넥틴은 종종 기판과 세포 접착을 증가인가된다. 피브로넥틴은 이종 ^{4 인테그린} 세포 표면의 10 개 종류로 인식 기저판 성분이다.

RA는 신경 분화 ^{(5, 6)을} 유도하는 비타민 A의 작은 친 유성 대사 산물이다. RA 고농도 신경 유전자 발현을 촉진하고 EB 형성 ^{7, 8} 중 중배엽 유전자 발현을 억제한다. RA는 레티 날 탈수소 효소 ^(9)에 의해 최종 제품 레티 산화 다음 중 알코올 탈수소 효소, 레티놀, 레티 날에 의해 산화 비타민 의해 제조된다. 신경 분화는 세포질에서 RA의 전송을 필요로 셀룰러 RA 결합 단백질 2 (CRABP2)에 의한 핵. 핵에서, RA는 RAR-RXR 헤테로 ¹⁰ 이루어진 동종 수용체 복합체에 결합한다. 이 전사 공동 활성제의 모집 및 전사 ^{(9), (11)의} 시작을 초래한다. 또한, RA 따라서 BMP 및 SMAD ¹² 시그널링 길항 인산화 (활성) SMAD1의 분해를 촉진시킨다. 이러한 활동 외에, RA는 PAX6 식 신경 분화 ^{13을지지하는} 전사 인자를 증가시킨다. RA 시그널링 시르-1 (SIRT1) 핵 니코틴 아마이드 아데닌 다이 뉴클레오타이드 (NAD +)에 의해 변조되고, – 핵으로의 전좌 방해 CRABP2을 deacetylates 의존성 효소, 따라서 RA가 RAR-RXR 헤테로 ^{14 (15)에 결합하여, (16).}

e_content은 "> 여기에 설명 된 RA 처리 EB 프로토콜을 설계하는 우리의 목표는 신경 전구 세포에 ESC 분화를 조절하는 신호 전달 경로의 체외 분석을 용이하게하기 위해 신경 분화를 최적화하는 것입니다.이 프로토콜의 장점 중 하나의 촉진이다 면역. 3D 사채 의한 세포 기능의 분석은 또한 항체 관통 신경 분화를 공 초점 현미경에 의해 immunolabeling 및 세포 이미징을 용이하게하는 동안 특정 시점에서 2 차원 단층으로 이미지. EB 해리하기 어려운 것은 아니다.