के लिए सीएनएस में लक्षित पदार्थ प्रसव माउस Microsurgery आसव तकनीक<i> के माध्यम से</i> आंतरिक मन्या धमनी
Summary
The present protocol describes a mouse microsurgery infusion technique, which effectively delivers substances directly into the brain via the internal carotid artery.
Abstract
Animal models of central nervous system (CNS) diseases and, consequently, blood-brain barrier disruption diseases, require the delivery of exogenous substances into the brain. These exogenous substances may induce injurious impact or constitute therapeutic strategy. The most common delivery methods of exogenous substances into the brain are based on systemic deliveries, such as subcutaneous or intravenous routes. Although commonly used, these approaches have several limitations, including low delivery efficacy into the brain. In contrast, surgical methods that locally deliver substances into the CNS are more specific and prevent the uptake of the exogenous substances by other organs. Several surgical methods for CNS delivery are available; however, they tend to be very traumatic. Here, we describe a mouse infusion microsurgery technique, which effectively delivers substances into the brain via the internal carotid artery, with minimal trauma and no interference with normal CNS functionality.
Introduction
केंद्रीय तंत्रिका तंत्र के विवो मॉडल में (सीएनएस) रोगों ऐसी दवाओं, रोगजनकों, या exosomes के रूप में exogenous पदार्थ, का एक प्रभावी वितरण, मस्तिष्क में आवश्यकता होती है। इसलिए, एक आदर्श वितरण पद्धति, जानवर के लिए कम से कम आघात का कारण neuronal नेटवर्क की अखंडता की रक्षा, और मस्तिष्क 1 में उच्च सांद्रता पदार्थ को प्राप्त करना चाहिए।
स्थानीय पदार्थ वितरण के कई शल्य चिकित्सा पद्धतियों का वर्णन किया गया है, इंट्रा-म्यान, इन्ट्रासेरेब्रल, और intraventricular इंजेक्शन या प्रत्यारोपण 2, 3, 4, 5 भी शामिल है। इन तरीकों, तथापि, सीएनएस के लिए दर्दनाक माना जाता है, और ब्याज के पदार्थ का केवल कम मात्रा के प्रशासन की अनुमति देते हैं। इसके अलावा, यह सुझाव दिया गया है कि exogenous पदार्थों तेजी से मस्तिष्कमेरु द्रव 6 से हटाया जा सकता है </s> अप, और मस्तिष्क पैरेन्काइमा के लिए एक कम पैठ रेंज 7 देखा गया है जब उपर्युक्त तकनीक कार्यरत हैं। इस तरह के मौखिक, फेफड़े, चमड़े के नीचे, और नसों में मार्गों के रूप में प्रणालीगत प्रसव के तरीके, और अधिक सामान्यतः, पशु मॉडल में इस्तेमाल कर रहे हैं, हालांकि वे सीएनएस के लिए पदार्थों के वितरण में कम प्रभाव को दिखा रहे हैं, अन्य अंगों 8, 9 द्वारा तेज की वजह से। इसलिए, प्रसव के इन मार्गों प्रशासित पदार्थों का ऊंचा खुराक की आवश्यकता होती है, दुष्प्रभाव और विषाक्तता 10, 11 का खतरा बढ़ रही है।
यहाँ, हम एक माउस अर्क microsurgery तकनीक है, जो प्रभावी ढंग से सीधे आंतरिक मन्या धमनी के माध्यम से मस्तिष्क में पदार्थों के उद्धार का वर्णन है। सीएनएस को प्रसव को निशाना बनाने के अलावा, इस तकनीक सामान्य शारीरिक बाधाओं को बाईपास नहीं है और इसलिए Biologica के लिए प्रासंगिक हैएल प्रक्रियाओं चिकित्सा विज्ञान या रोगजनकों मस्तिष्क में के मार्ग में शामिल किया गया।
Protocol
Representative Results
Discussion
आसव microsurgery यहाँ वर्णित सीएनएस में विभिन्न जैविक सुविधाओं के बहिर्जात पदार्थों पहुंचाने, शरीर 1, 12 के दौरान अवांछित प्रचार-प्रसार को रोकने में बहुत सफल साबित हुई किया गया है। रक्त मस…
Offenlegungen
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
We would like to thank Dr. Lei Chen (Icahn School of Medicine at Mount Sinai, NY) who first established the use of this model in our laboratory, and to Dr. Gretchen Wolff (German Cancer Research Center, Heidelberg, Germany) for disseminating the technique in our laboratory. Supported in part by HL126559, DA039576, MH098891, MH63022, MH072567, DA027569, and NSC 2015/17/B/NZ7/02985.
Materials
| Anesthesia instrument | Vetequip | 901806 |
| Surgical scissors | Fine Science Tool | 14558-09 |
| Surgical forceps straight tip | Fine Science Tool | 00108-11 |
| Surgical forceps angled tip | Fine Science Tool | 00109-11 |
| Spring scissors | Fine Science Tool | 15000-08 |
| Nylon suture | Braintree Scientific | SUT-S 104 |
| Capillary tubing (Micro-Renathane 0.010” x 0.005” per ft.) | Braintree Scientific | MRE01050 |
| Closing suture | VWR | 95057-036 |
| Isoflurane | Piramal | |
| 2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride | FisherScientific | 50-121-8005 |
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