Summary

Bir Zenginleştirilmiş Ortamında Konut Fareler için Protokol

Published: June 08, 2015
doi:

Summary

Environmental enrichment for mice requires a complex and challenging setup, as well as comprehensive husbandry and handling techniques to assure robust metabolic and anti-cancer effects in the mice. This protocol provides detailed procedures to reproduce the above mentioned effects in mice.

Abstract

Environmental enrichment (EE) is a housing environment for mice that boosts mental and physical health compared to standard laboratory housing. Our recent studies demonstrate that environmental enrichment decreases adiposity, increases energy expenditure, resists diet induced obesity, and causes cancer remission and inhibition in mice. EE typically consists of larger living space, a variety of ‘toys’ to interact with, running wheels, and can include a number of other novel environmental changes. All of this fosters a more complex social engagement, cognitive and physical stimulations. Importantly, the toy location and type of toy is changed regularly, which encourages the mice to adapt to a frequently changing and novel environment. Many variables can be manipulated in EE to promote health effects in mice. Thus these approaches are difficult to control and must be properly managed to successfully replicate the associated phenotypes. Therefore, the goal of this video is to demonstrate how EE is properly set up and maintained to assure a complex, challenging, and controlled environment so that other researchers can easily reproduce the protective effects of EE against obesity and cancer.

Introduction

Çevresel zenginleştirme (EE) hayvanlar 1 stres değil, karmaşık ve zorlu bir ortamda etkilerini araştırmak için kullanılan deneysel bir paradigma. EE sırayla duyusal, bilişsel, motor, sosyal stimülasyon 2 artar artan boşluk, fiziksel aktivite ve sosyal etkileşimler, oluşan bir hayvan konut tekniğidir. Konut ortamında Depoları, çalışan tekerlekler, daire jantlar, tüp labirentine ve diğer nesneleri keşif ve etkileşim teşvik ederek bu duyusal bilişsel, sosyal ve motor stimülasyonu teşvik. muhafaza değişiklikleri nesnelerin yerleşimi düzenli fareler uyarlamak zorunda olduğu bir roman ortamı sunmak. Bu strateji, daha caydırıcı, düşmanca bir ortamda ya da uyumsuz sıkıntı 3,4 aksine, eustress olarak bilinen, yararlı iyi huylu ve sağlıklı adaptif tepkiyi, teşvik hafif ve kısa zorluklar sunuyor. , Fareler eustress teşvik ve zararlı sıkıntı sınırlayarakolumlu fenotip bir çeşitlilik göstermektedir.

Geleneksel olarak stresli 1 düşünce unsurları yoksun olurken EE, geniş bir uygulama yelpazesi ile güvenilir bir deneysel model. kemirgenler üzerinde EE etkileri daha yarım yüzyıl için çalışılmıştır. 1960'ların başında çalışmalar kortikal kolinesteraz düzeyleri azalmış ve subkortikal kolinesteraz düzeyleri artan yaşam alanı, sıçan sayısının artması ve ahşap oyuncaklar, labirentine ve platformların 5,6 çeşitli ortamlarda muhafaza edilmiş sıçanlarda arttığını gösterdi. Buna ek olarak, EE farklı yaş ve genetik arka farelerde beyin, davranış ve metabolizmasında pek çok uyarlanabilir değişikliklerle ilişkilidir. Bu nedenle, EE fareler üzerinde çevrenin etkisini inceleyerek deneyler geniş bir kapsam için yararlı bir paradigma olduğunu. EE etkileri bir haftalık maruz olduğu kadar hızlı farelerde gözlenen edilebilir ve on sekiz ay 7 kadar eski hayvanlarda görülmektedir. EE u genelliklefonksiyonun kurtarma, öğrenme ve hafıza 2 incelemek için nörobilim ve nörodavranışsal deneylerde sed. Ayrıca, EE toksin kaynaklı ve Huntington hastalığı, Alzheimer hastalığı, Parkinson hastalığı, epilepsi, felç dahil olmak üzere insan nörolojik hastalıkların transgenik hayvan modelleri çeşitli fenotipi üzerinde önemli bir etkisi vardır ve 2 daha fazla.

Ancak, yıllar içinde zenginleştirme tasarımı zor farklı laboratuvarlardan çalışmalar arasında karşılaştırma yapma tutarsızlık olmuştur. Örneğin, yukarıda adı geçen insan nörolojik hastalıklara göre EE etkileri ile ilgili çalışmalar her zenginleşmesine parametreleri değiştirilerek vardı. Huntington hastalığı üzerine çalışma iki günde 8,9 değişti karton kutular, tüneller ve yaprak içeren büyük kafeslerde (44 x 28 x 12.5 cm 3) yanı sıra, ahşap ve plastik nesneleri 4-6 fareler yer. Alzheimer üzerinde yapılan çalışmalardan biri# 8217; s 2 çalışan jantlar, plastik tüpler, karton kutular ve değiştirilemez veya 10 haftalık yeniden düzenlenmiştir yuvalama malzeme içeren daha geniş bir kafes (1 m 3) 20 fareler barındırdı. EE Birçok kurulumları gibi çalıştırmak veya gizlemek için nesneler olarak benzer temalar var, henüz EE konut, yaşam alanı başına düşen farelerin sayısı ve çevreyi değiştirme süresi çok değişir.

EE tutarsız tasarımlar EE etkileri başarısız çoğaltma yol açmıştır. Kanser ve metabolizması üzerindeki Verilerimiz birlikte göstermektedir ki önemli anti-kanser ve anti-obezite etkileri 14,15 için aşağıdaki ayrıntılı EE muhafaza protokolü kurşun sağlanan uyarıların kombinasyonu. Ancak, birinde görüldüğü gibi, EE sonuçlarını etkileyebilecek farklı laboratuvarlar tarafından benimsenen EE ayarlarının fark farelerde 11 implante spesifik kanser tümörlerinin büyümesi üzerine EE etkilerini çoğaltmak girişimi başarısız oldu. Farklı sonuçlar fro değişen çeşitli nedenlerle nedeniyle olabilirkonut ekipmanları 11 temizliği için kullanılan deterjan türüne tümör hücre kültürlerinin farklı büyüme oranlarını m. Bizim deneylerde görülen sonuçların çoğaltmak amacıyla, zenginleştirme ve hayvancılığın belirli bir tasarım gereklidir. Aşağıdaki prosedür, diğer araştırmacılar başarıyla etkili zenginleştirme modeli tekrarlamayı sağlayacak EE konut ayrıntıları.

Protocol

Aşağıda açıklanan prosedürler Ohio State Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi (IACUC) tarafından onaylanmıştır. Konut Fareler için Zenginleştirilmiş Çevre 1. Hazırlık önce Temizlik ve enstrümanların bulundurulmasına. Bir kafes yıkama yoluyla büyük zenginleştirme bin (120 cm x 90 cm x 76 cm) çalıştırın. Tipik Hayvan Tesisi kafes yıkama protokolü 82 ºC ulaşan son döngü ile 5 ila 6 yıkama döngüleri içerir. Bütün yıkama yaklaşık 40 dakika sürer. Bin Hava kurutun. Büyük zenginleştirme bin ve diğer konut aletleri, kafes yıkama yoluyla gönderilen edilemezse, o zaman sprey ve üreticinin talimatlarına sporisidal dezenfektanlarla bin içini silin. Bir önceki dezenfektan herhangi kokusu kurtulmak için bir kağıt havlu ile bir musluk suyu batırılmış kağıt havlu ya da% 30 etanol ve kuru ile bin siliniz. Kullanım plastic boru, daire tipi tekerlekli igloos ve EE diğer çeşitli plastik dolap gibi oyuncaklar. Bir kafes yıkama yoluyla bu oyuncakları yıkayın. Bir kafes yıkama takip adımı 1.1.1.1 erişiminiz yoksa. EE metal çalışan tekerlekleri kullanın. Bir kafes yıkama yoluyla tekerlekleri yıkayın. Tekerlekler üzerinde boya böylece hayvanların üzerinde çalıştırdığınızda tekerlek gürültülü olur solmaya başlarsa, tekerlek ve axel bağlamak nerede küçük bir miktar vazelin uygulayın. EE ahşap günlükleri kullanın. Elle herhangi yataklar ya da diğer enkaz kaldırarak günlükleri temizleyin. Daha sonra 15 dakika boyunca 121 ° C bir sıcaklığa ulaşıncaya kuru çevrim ya da tekstil döngüsü, bunları otoklav ile sterilize günlükleri. Bir beslenme ve içme tel kafes için ön alt dışında bir delik çapı en az 5 cm rack.Cut tutmak için 29 cm x 18 cm x 12.5 cm x 19 cm x 14 cm 30.5 cm boyutları arasındaki kafesleri kullanın fareler EE gelen ve dışarı çıkmak için. Kafes yıkama yoluyla bu beslenme kafesleri temizleyin. Çevreyi ayarlama Büyük zenginleştirme kutusu içine ¼ inçlik mısır koçanı laboratuvar hayvanları yatak dökün. Yatak takımları ile 2-2.5 cm derinliğe kadar bin tüm zemin yüzeyini kaplayan. Bin bir köşesinde iki ya da üç günlükleri yerleştirin. Köşedeki yerleştirin günlükleri yaklaşık 1.225 cm 2 lik bir alanı ayırmak için. Günlükleri tarafından tecrit alanda, üstüne tabak tekerlekli üç igloos yerleştirin. Tekerleklerin serbestçe dönmeye için yeterli oda var ki jantlar, bin, günlükleri, ya da birbirlerinin duvarlarına temas etmediğinden emin olun. Adet birlikte plastik boru, böylece centeral bağlama parçasının dışarı birden silah dalı. Bin ortasında bu boru yerleştirin. Bin iki köşelerinde, tek besleme kafesi bin ile aynı yatak ile dolu her yer ve beslenme kafesin önünde delik bin merkezine doğru dönük olmalıdır. Bu beslenme kafeslerde temiz gıda ve su tel üstündeyiyecek ve su tutmaya konulmalıdır. Kafes üzerinde herhangi bir kapağı koymayın. Kafes teller yiyecek ve su koyun. Birbirine olsa gelecek değil, tüm bin üç metal jantlar yerleştirin. tekerleklerin üç farklı biri 11.5 cm tekerleği, tek 20,5 cm tekerlek ve bir 28 cm tekerleği vardır. Ardından zenginleştirme bin genelinde 4-5 daha plastik dolap gibi oyuncak ya da tüneller yerleştirin. Mikro-izolatör filtre kağıdı ile bin örtün. Bin filtre kağıdının klibi için bağlayıcı klipleri kullanın. Yenilik EE önemlidir. Hayvanlar için yeni bir ortam yaratmak için EE çerçevesinde bu kurulum kullanın ve yukarıda belirtilen kafeslerde, nesneler ve oyuncak yerleştirme değişir. 2. Konut Hayvanlar EE düzenli laboratuvar konut ve deneyler için hayvanların Breed. İsteğe bağlı olarak, sütten üzerine EE yaş gibi erken 21 olarak gün hayvanları yerleştirin. Önce EE konut Genotip ve kulak delme / etiket hayvanlar. YerleştirirkenHayvanlar zenginleştirme kutusuna standart kafes serbestçe hareket edebilir, böylece standart bir kafes zenginleştirme kutusu içine hayvanlar, yan bin kafesini yerleştirin. Yuvalama materyalleri zenginleştirme kutusu içine transfer edilmesine izin vermeyin. Ev EE aynı yaş, cinsiyet ve genetik gerginlik 10-20 hayvanlar. 3. Ortamı bakımı ve Çalışmalar sırasında Fare gözlemleme Günlük Sessizce hastalık ya da sıkıntı belirtileri hayvanları gözlemlemek. Gerekirse, yavaşça ileri sağlık koşulları incelemek için hayvanları anlaştım. Tutanak anormal gözlem ve deney çıkarılmasını gerektiren hayvan görüntüler koşulları eğer bir sağlık teknisyeni veya veteriner personeli danışın. Küçük yaralar ya da grev kırıcılar için üçlü anti-biyotik merhem topikal tedavi sağlamak. Bir hayvan kronik bir hastalık ya da yaralanma nedeniyle kaldırılması gerekiyor ise ötenazi için deney hayvan kaldırmak. Hayvanların Eğergeri EE hayvanların iade yok nezaret hayvan araştırma bakım komitesi veya veteriner erken çıkarma kriterleri karşılamak. Haftada iki kez Yem ve su seviyelerini kontrol edin. Bu besleme sağlanması ve su önümüzdeki 3-4 gün sürecek. Bunlar yayılır ve fareler tarafından kullanılabilir, böylece çalışan tekerlekler ve zenginleştirme oyuncakları düzleştirin. Çok kirli olduğunu herhangi değiştirin. Haftalık Temiz su şişeleri ile su şişeleri değiştirin. Bölüm 1.2'de kurulum izleyen bir şekilde zenginleştirme cihazları yeniden düzenleyin. Henüz geçen hafta kurulumu farklıdır. NOT: Bir deney bir faaliyet için zenginleştirilmiş bir ortamda kaldırılacak hayvanları gerektiriyorsa (vücut ağırlığı, kan beraberlik, davranış testi, vb kayıt) o hayvanların uzak zenginleştirme kutusundan ise çevreyi yeniden düzenlemek için en iyisidir. Elle EE besleme kafesleri temizleyin ya da kafes yıkama yoluyla göndermekolarak Bölüm 1.1.5 ayrıntılı. Hem de temiz tel raflar ile yiyecek ve su tutun tel rafları değiştirin. Bölüm 2.2'de talimatları uygulayın. zenginleştirme geri hayvanları yerleştirirken. Gerekirse kirli çöp dışarı karıştırıyordu ve yeni temiz yatak aşağı yayarak, geniş zenginleştirme bin ve temiz geri kalanını kontrol nokta. İki haftalık Haftalık yetiştiriciliği yapılırken, elle oyuncak temizlemek veya Bölüm 1.1.2 ayrıntılı olarak kafes yıkama yoluyla gönderebilirsiniz. Gerekirse, temizleme için gerekli olan bir süre için, standart bir mikro-izolatör kafese fareler yerleştirin. Aylık Zenginleştirme oyuncaklar hareketli ve kafesleri beslenme ve çöp dışarı karıştırıyordu ile çöp dışarı çoğunluğu temizleyin. Taze çöp ile değiştirin. Kafesin her alanda yatak bir inç olduğundan emin olun. Gerekirse, temizleme için gerekli olan bir süre için, standart bir mikro-izolatör kafese fareler yerleştirin. Her üçAylar (ya da Deney Sonunda) Tüm yatak ve oyuncaklar ve temiz çıkarın ve Bölüm 1.1.1 de açıklandığı gibi zenginleştirme bin dezenfekte edin. Deney devam ediyorsa, kafesleri, oyuncak çeşitleri beslenme, yeni yatak ile değiştirin ve sonra bin fareler dönün. EE yer aldığı araştırma kurumu tarafından isteniyorsa her üç ayda daha sık tüm zenginleştirme bin dezenfekte edin. Bu gerekli ve başka bir büyük zenginleştirme konteyner Bölüm 1.2'de ayrıntılı olarak ek zenginleştirme konteyner kurmak, varsa. bir önceki temizlenir edilirken ve yeni kaba hayvan aktarın. 4. Kontrol Konut Koşulları Boyutları 30.5 cm x 19 cm x 14 cm Mikro-izolatör kafesler kontrol grubunda ev hayvanları. Kafes bir otomatik sulama sistemine bağladım değilse, gıda ve su şişesi tutmak için kafes içinde bir tel raf ekleyin. EE olduğu gibi kontrol kafes içinde aynı mısır koçanı yataklar sağlayın. Fareler dışında bir yuva yapmak için 4 cm x 4 cm nestlet sağlayın. Haftada bir kez teller, yiyecek ve su besleme, değiştirin ve / veya kafesleri temizleyin. Kafesleri ve tel raflar temiz kafes yıkama yoluyla veya Bölüm 1.1.1.1 olarak detaylı. Hayvanlar daha sık ya da yatak üzerine içme suyu sızıntıları varsa idrarını eğer daha sık kafesleri temizleyin. Kontrol konut gazetesi hayvanların sağlığını izlemek. Hayvanlar yiyecek ve bol su var emin olunuz. Düzenli fare kafes içinde aynı cinsiyetten Evi 3 ~ 5 fareler. Kafese bir oyuncak, tüp ya da kafesi vermeyin. Kurumsal laboratuvar hayvan bakım tesisi sağlığı ve laboratuar teknisyenleri bu kontrol fareler yetiştiriciliği sağlayabilir. EE fareler için olduğu gibi, 12 saat aydınlık / karanlık döngüsünde hayvanları tutun.

Representative Results

EE, büyüme faktörü ifadesini etkileyen merkezi sinir sistemi (MSS) 12,13 olan nöron ve hücrelerin yaşam süresini arttırmaktadır. Daha yeni çalışmalar, EE, bu teknik, bir tohum çizgisi mutasyon içerir ve spontan adenom oluşumuna karşı çok duyarlı olan B16 melanom, MC38, kolon kanseri, ve APC dakika / + fare de dahil olmak üzere üç fare kanser modellerinde kanser gelişiminin belirgin bir bastırılmasına neden olduğu gösterilmiştir Bağırsaklar 14. Şekil 2 teyit sonuçları 5 hafta (~ tümör kitlesi% 80 düşüş) için EE maruz kalan farelerde implante B16 melanom tümör büyümesinin baskılanması. Tümör 14 kurulduktan sonra EE başlatıldığı zaman kanser gelişimini bastırma-farelerde bile gözlenmiştir. EE normal kilolu (~ tümör kütlesinin% 50 azalma), 14, farelerde daha yüksek yağlı diyet kaynaklı obezite, farelerde melanom büyüme (~ tümör kütlesinin% 70 azalma) daha fazla inhibisyonuna yolaçtı. EE ind Sağlam leptinin damla, IGF-1 azalması ve adiponektin düzeyleri 14 artış da dahil olmak üzere, serum biyomarkerlerindeki uced imza değişir. Buna ek olarak, EE, bu teknik, yağlanmayı azaltır, enerji harcanmasını artırır, diyetle uyarılan obeziteye karşı direnç yol açar ve 15 ekseni hipotalamo-sympathoneural-adiposit etkinleştirerek kahverengi bir yağ fenotipik anahtara beyaz indükler. adiposity azalma EE maruz erken altı gün görüldü (Şekil 3A, B) ve yine dört hafta (Şekil 3C, D) için EE maruz kalan hayvanlarda doğruladı. O (yani, biri EE ile ilişkili anti-kanser ve anti-obezite etkileri iki EE etkileri beyin kaynaklı nörotrofik faktör aşırı ifadesi ile çoğaltılabilir, tek başına fiziksel aktivite ile hesaba ve olamaz da not etmek BDNF önemlidir ) hipotalamus 14,15 olarak. 2874fig1.jpg "/> Şekil 1: Zenginleştirilmiş çevre bin kurmak zenginleştirilmiş ortam x 90 cm 120 cm bir alana sahiptir ve daire jantlar, plastik boru, ahşap günlükleri ve diğer plastik zenginleştirme oyuncakları ile iki modifiye kafesleri, çalışan tekerlekleri, igloos içerir.. Şekil 2: Zenginleştirilmiş ortamı C57BL / 6 erkek farelerde tümör büyümesini azaltır üç haftalık erkek fareler, tümör aşılamasından önce 5 hafta boyunca EE veya kontrol kafeslerde ev edildi.. Sağ böğrüne subkutan, yukarıda sıralanan hayvan başına 10 5 hücre aşılamadan sonra 17 gün B 16 melanoma tümör ağırlıkları (grup başına n = 10. Student t-testi, * p <0.05). s / ftp_upload / 52874 / 52874fig3c.jpg "/> Şekil 3: Zenginleştirilmiş çevre C57BL / 6 erkek farelerde adipozitenin azaltır Üç haftalık fareler EE tabi tutulmuştur;. Dört hafta içinde, 6 gün, başka bir grup. (A), EE altı gün (* p <0.05, n = grup başına 5. Student t-testi) yağ yastığı ağırlıkları azalmıştır. (B) 'EE altı gün (* p <0.05, n = grup başına 5. Student t-testi) göre vücut ağırlığı yağ yastığı ağırlıkları azalmıştır. (C), EE içerisinde dört hafta (* p <0.05, n = grup başına 5. Student t-testi) yağ yastığı ağırlıkları azalmıştır. (D), EE içerisinde dört hafta (* p <0.05, n = grup başına 5. Student t-testi) göre vücut ağırlığı yağ yastığı ağırlıkları azalmıştır. BAT: kahverengi adipoz doku, IWAT: kasık beyaz yağ dokusu, EWAT: epididimal beyaz yağ dokusu,RWAT: Retroperitoneal beyaz yağ dokusu.

Discussion

Beyindeki gen ifadesinin üzerine EE sağlam etkileri henüz şişmanlık ve farelerde kanser büyüme fiziksel aktivite, sosyal etkileşim ve bilişsel zorluklar teşvik eden bir şekilde hayvanlara roman ortamı korumak ve işlemek için araştırmacının yeteneğine ağır bağlı azalmış değil sıkıntı hayvanları yok. Hatırlanması gereken en önemli iki usul adımlar vardır. Birincisi, her hafta oyuncaklar, nesneler ve kafesleri yerleşimini değiştirmeyi unutmayın. Oyuncak ve objeler önceki haftaya aynı olabilir olsa da, fareler roman olarak çevreyi algılarlar. Oyuncaklar değiştirin ve her hafta farklı olanları kendilerini nesneleri. İkincisi, çevreyi temiz tutmak için unutmayın. Kirli yatak kaldırılan almazsa, artan azot seviyelerinin hayvanlara bir stres olabilir.

Buna ek olarak, bu EE protokolü not için bir çok teknik vardır. Farklı veya benzersiz oyuncaklar ve farklı kullanımıplastik boru labirentine tasarımları teşvik edilmektedir. Çevre zor olabilir ama hayvanların sağlığı için bir tehdit değil. Işlevsiz oyuncaklar yakalandığını fare bacaklarda riskini artırır, ya da çiğneme tüketilen eğer hayvanlara zehirli olabilir çünkü Ayrıca, işlevsiz olan oyuncak sakının. EE One sabiti 2-3 günlüklerine göre bin bir köşesinde ya da yanına tecrit igloos üstünde üç tabak jantlar, kullanımıdır. Günlükleri arkasında tabaklar çalışan Bu kurulum tüm zenginleştirme çalışmalarında mevcut olmuştur. Diğer nesnelerin kullanımı ve yerleştirme açısından, düzen açıklaması yukarıdaki EE kurulumu temel bir mavi baskı olduğunu. Plastik boru bu temel çerçevesinde, rapor edilen sonuçları üretmek için yeterli bir roman ortamı sağlamalıdır tabaklar, kafesleri ve günlükleri çalışan, tekerlekleri çalışan kurulum değişimi.

Diyabet veya diğer metabolik sahip transgenik hayvanlar ile çalışma durumundahastalıklar, hayvanlar yiyecek ve su tükendi yok emin olmak için gıda ve su tüketimi yakın ilgi. Hayvanlar diyabet varsa, onlar daha çok idrara, böylece EE konut yatak nokta kontrol ve daha sık temizlenmesi gerekebilir. yatak en sık kaldırıldı ihtiyacınız EE konut yerlerde köşeleri vardır. Onlar hayvanlar tarafından kullanılabilir, böylece tekerlekler ve diğer oyuncaklar ayarlamak unutmayın. hayvanlar yatak içine tabak tekerlekleri çalışan ve üzerinde çalışan tekerlekleri vurma yeteneğine sahiptir. Hayvanlar yaş 3 ila 5 hafta genç iseler, hayvanların nerede clueless olarak araştırmacı bırakarak, EE kafesleri altında kazmak ve orada altında birlikte gizlemek olabilir. , Kirli yataklar çıkarma oyuncakları değiştirmek veya kafesleri temizlerken, onların çevreye ayarlarken onları stres vermeyecek şekilde temiz bir standart kafes hayvanları koymak önerilir. Onlar env gizlemek için daha az yer varsa, bir kafes içinde tüm hayvanlar elde etmek kolaydırironment. Bu nedenle, bir kafes içinde hayvanların tecrit önce oyuncak kaldırma işlemi kolaylaştırır. Temizlik için bekleyen ya da EE çevreyi ayarlarken Dahası, tek bir standart kafeste fazla 5-6 hayvan koymayın. EE yetişkinlikte başlatılır özellikle EE erkek hayvanların saldırgan olabilir. Bu nedenle, herhangi bir yaralı veya ölü hayvanlar için çevreyi gözlemlemek önemlidir.

Buna ek olarak, kabın bu büyük boyutu için EE ev hayvanları tipik sayısı 10-20 fare. EE evine hayvanların sayısını belirlenirken yaklaşık 10 ya da daha az fareler kullanılarak diğer araştırmacılar değişir EE kullanılan hayvanların sayısı, ve kafes ya da depo boyutu göz önüne alınmalıdır. Yaşayan bir ortamda çok fazla hayvan olması erkek farelerde saldırganlık neden olabilir. Biz EE muhafaza olan fareler C57BL / 6 kökenden olmuştur. Diğer soyların Fareler daha fazla veya daha az agresif veya daha fazla eğilimli sağlık sorunları olabilirBu EE kurulumu. Bu fareler ve zenginleştirilmiş bir çevre için hayvancılık planını belirlenmesinde dikkate alınmalıdır.

Dört hafta EE muhafaza şişmanlık azalma, leptin seviyesi damla ve B16 melanoma gelişiminin inhibe edilmesi için yeterlidir. Uzun EE metabolizma ve kanser inhibisyonuna güçlü etkilere yol açabilir. Farenin sırasında ya da EE maruz bırakılmadan önce, cerrahi prosedürlerden geçen durumunda, tek parça halinde dikiş ile yerleştirilebilir. Olsun ya da olmasın hayvanların cerrahi zımba veya çalışma yapılmamıştır sağlam kateterler ile bu özel EE kurulum iyi yanıt verir. Ayrıca, şu anda bu belirli EE yaşlı hayvanların ömrünü veya Healthspan'in nasıl etkilediğini araştırıyor. Ön veriler, dişi C57BL / 6 fareleri, yaşı 10 ay, genç farelerde benzer EE yanıt olduğunu göstermektedir. EE konut bir sınırlama ve tercihen bir cinsiyete özgü bir odada, hayvan tesis uzayda böyle büyük bin uzlaşmacı. Eff üzerinde Böylece gelecekteki çalışmalardaha küçük bir ölçekte EE ects yanı sıra, temiz yüksek sıcaklık temizlik tahammül kolay ve hayvanların sağlığı için güvenli bulgu oyuncaklar, metabolik ve kanser araştırmalarında EE uygulamaları artıracaktır.

Offenlegungen

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

NIH tarafından desteklenen bu çalışma LC CA163640, CA166590 ve AG041250 verir.

Materials

Large enrichment bin (120cm x 90cm x 76cm) Custom made. Custom made. Made of polypropylene. Edges of the bin are 1.5cm thick.
Large enrichment bin alternative (120cm x 110cm x 76cm) Global Industrial 155202 If necessary, this bin works as an alternative to the one above.
Habitrail Mini tubes Habitrail 62720; 62705; 62725; 62715; 62054
Plastic igloos with saucer wheels Bio Serv K3327; K3250
Metal Running Wheels Super Pet 61392; 61394; 61396
Manzanita Wood Gnawing Sticks, 3" Bio Serv W0016
Mouse Tunnels Bio Serv K3322
Mouse cages that go in the large EE bin. Lab Products Inc 10027 Mouse Cage
Cage Klenz 180 Alkaline Cage Wash Detergent, Cage Klenz 250 Acid Detergent Steris Life Sciences 1K1802; 1K2502 These detergents are used in the cage wash for the toys, large enrichment bins, and cages.
Sporklenz Steris Life Sciences 6526Q8 Alternative sporicide/disinfectant to washing toys, bins, and cages in cage wash.
Bed-O-Cobs 1/4" bedding The Andersons, Inc. 4B Corn cob bedding is 1/4" in diameter.
Nestlets for control housed mice Ancare Cotton squares

Referenzen

  1. Cao, L., During, M. J. What is the brain-cancer connection. Annu. Rev. Neurosci. 35, 331-345 (2012).
  2. Nithianantharajah, J., Hannan, A. J. Enriched environments, experience-dependent plasticity and disorders of the nervous system. Nat. Rev. Neurosci. 7, 697-709 (2006).
  3. Milsum, J. H. A model of the eustress system for health/illness. Behav. Sci. 30, 179-186 (1985).
  4. Selye, H. . Stress Without Distress. , (1974).
  5. Krech, D., Rosenzweig, M. R., Bennett, E. L. Effects of environmental complexity and training on brain chemistry. J. Comp. Physiol. Psychol. 53, 509-519 (1960).
  6. Rosenzweig, M. R., Krech, D., Bennett, E. L., Diamond, M. C. Effects of environmental complexity and training on brain chemistry and anatomy: A replication and extension. J. Comp. Physiol. Psychol. 55, 429-437 (1962).
  7. Frick, K. M., et al. Effects of Environmental Enrichment on Spatial Memory and Neurochemistry in Middle-Aged Mice. Learn. Mem. 10 (3), 187-198 (2003).
  8. Dellen, A., Blakemore, C., Deacon, R., York, D., Hannan, A. J. Delaying the onset of Huntington’s in mice. Nature. 404, 721-722 (2000).
  9. Spires, T. L., et al. Environmental enrichment rescues protein deficits in a mouse model of Huntington’s disease, indicating a possible disease mechanism. J. Neurosci. 24 (9), 2270-2276 (2004).
  10. Jankowsky, J. L., et al. Environmental enrichment mitigates cognitive deficits in a mouse model of Alzheimer’s disease. J. Neurosci. 25 (21), 5217-5224 (2005).
  11. Westood, J. A., Darcy, P. K., Kershaw, M. H. Environmental Enrichment does not impact on tumor growth in mice. F1000Research. 2, 140 (2013).
  12. Cao, L., et al. VEGF links hippocampal activity with neurogenesis, learning. Nat. Genet. 36 (8), 827-835 (2004).
  13. Young, D., Lawlor, P. A., Leone, P., Dragunow, M., During, M. J. Environmental enrichment inhibits sponta- neous apoptosis, prevents seizures and is neuroprotective. Nat. Med. 5 (4), 448-453 (1999).
  14. Cao, L., et al. Environmental and genetic activation of a brain-adipocyte BDNF/leptin axis causes cancer remission and inhibition. Cell. 142 (1), 52-64 (2010).
  15. Cao, L., et al. White to brown fat phenotypic switch induced by genetic and environmental activation of a hypothalamic-adipocyte axis. Cell Metab. 14 (3), 324-338 (2011).

Play Video

Diesen Artikel zitieren
Slater, A. M., Cao, L. A Protocol for Housing Mice in an Enriched Environment. J. Vis. Exp. (100), e52874, doi:10.3791/52874 (2015).

View Video