Summary

Traza el condicionamiento del miedo en ratones

Published: March 20, 2014
doi:

Summary

En el siguiente experimento se describe un protocolo para rastrear el miedo acondicionado en ratones. Este tipo de memoria asociativa incluye un período de seguimiento que separa el estímulo neutro y el estímulo no condicionado.

Abstract

En este experimento se presenta una técnica para medir el aprendizaje y la memoria. En el protocolo acondicionado rastrear el miedo que se presenta aquí hay cinco emparejamientos entre un estímulo neutro y un estímulo incondicionado. Hay un período de 20 segundos traza que separa cada ensayo acondicionado. En la siguiente congelación día se mide durante la presentación del estímulo condicionado (EC) y el periodo de rastreo. En el tercer día hay una prueba de 8 min para medir la memoria contextual. Los resultados representativos son de los ratones que fueron presentados con el estímulo incondicionado aversivo (shock) en comparación con los ratones que recibieron las presentaciones de tono sin el estímulo incondicionado. Traza el condicionamiento del miedo se ha utilizado con éxito para detectar los déficits de aprendizaje y memoria y mejoras sutiles en los ratones que no se encuentran con otros métodos de condicionamiento del miedo. Este tipo de condicionamiento del miedo se cree que es dependiente de las conexiones entre la corteza medial prefrontal y el hipocampo. Una controversia actual es si se cree que este método es-amígdala independiente. Por lo tanto, es necesaria otra prueba acondicionado miedo para examinar los efectos de aprendizaje y memoria de la amígdala-dependientes, como a través del retardo condicionamiento del miedo.

Introduction

En el condicionamiento del miedo un estímulo neutro (NS) está emparejado con un estímulo aversivo incondicionado (EE.UU.). El NS es normalmente un tono y se convierte en un estímulo condicionado (EC) a través de apareamientos repetidos con los EE.UU.. El CS puede entonces provocar una respuesta condicionada (RC), tales como la congelación, en ausencia de la aversivo EE.UU.. Un protocolo acondicionado temor comúnmente utilizado es el retraso acondicionado. En este protocolo la aparición de la SN y los EE.UU. es contigua o con algún solapamiento en la presentación del estímulo. A pesar de que demora el condicionamiento del miedo es uno de los tipos más comunes de temporal acondicionado asociativo, hay varios otros tipos de arreglos temporales acondicionado asociativa: acondicionamiento simultánea, acondicionamiento de espaldas, y traza acondicionado 1. En traza el condicionamiento del miedo hay un intervalo de estímulo libre entre la SN y los EE.UU. de varios segundos que resulta en un período de "rastro".

Varios estudios han reportado déficits en traza el condicionamiento del miedo cuando lesiones neurotóxicas se producen en las estructuras que la entrada en el hipocampo 2-5 o cuando los agentes farmacológicos se utilizan para bloquear la función del receptor en el hipocampo. Lesión a los resultados del hipocampo en los déficits en rastro acondicionador y acondicionador contextual, pero no perjudica demora el condicionamiento del miedo 8. Hay varias ventajas a usar traza el condicionamiento del miedo. El protocolo acondicionado temor se puede lograr en un período de prueba de tres días de la memoria y permite hipocampo-dependiente que no es espacialmente dependiente. Traza el condicionamiento del miedo puede ser utilizado como una prueba complementaria para el laberinto de Morris agua, nuevo test de reconocimiento de objetos, u otras pruebas de laberinto en la investigación de la memoria dependiente del hipocampo.

Protocol

Los ratones usados ​​en el experimento siguiente se generaron y se alojaron en la Universidad de Baylor en una temperatura ambiente de 22 ° C, con una luz de 14 horas y 10 horas de oscuridad (20:00-06:00 h) ciclo diurno. Los ratones se les dio acceso ad libitum a comida y agua. Todos los procedimientos a los ratones estaban en el cumplimiento de los Institutos Nacionales de Salud para el Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio y el protocolo de los animales fue aprobado por la Universidad de Baylor Cuidad…

Representative Results

Para obtener resultados representativos se presentan datos de C57BL/6J ratones adultos control que recibieron los emparejamientos de estímulo neutro con el estímulo no condicionado (condición shock) en comparación con los ratones que recibieron el estímulo neutro, pero no recibieron el estímulo incondicionado (sin condiciones de choque). Es importante ejecutar esta condición cuando el ajuste inicial de esta prueba de comportamiento para determinar si el protocolo se ha realizado correctamente. <p class="jove_…

Discussion

Se han realizado varios estudios que han aclarado el circuito neural que subyace traza el condicionamiento del miedo. Se cree Trazar el condicionamiento del miedo de involucrar a la CA1 del hipocampo 12-14. También hay evidencia de que la corteza prefrontal medial (mPFC) desempeña un papel importante en la traza de ojos parpadean acondicionado 15, y el córtex prefrontal medial se ha encontrado a participar en traza el condicionamiento del miedo. Un estudio encontró que las neuronas mPFC proporc…

Offenlegungen

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Este trabajo es apoyado por una beca de la Universidad de Baylor Research Council y de una beca de investigación de la Fundación para la Epilepsia.

Materials

FreezeFrame Coulbourn
30% Isopropanol Purchase 90% isopropanol and dilute it down to 30%
70% Ethanol
Amp-meter Med-Associates ENV-420 Windows XP, Vista, and 7 Compatible (32-bit only)
Digital Sound Level Meter 33-2055
Vanilla Extract McCormick Pure Vanilla Extract
Sticky Notes Post-it 3X3 inch

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Diesen Artikel zitieren
Lugo, J. N., Smith, G. D., Holley, A. J. Trace Fear Conditioning in Mice. J. Vis. Exp. (85), e51180, doi:10.3791/51180 (2014).

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