Multispectral הדמיה בזמן אמת Fluorescence לגילוי intraoperative של הצומת סנטינל הלימפה גניקולוגיות אונקולוגיה

1. Intraoperative מצלמה Fluorescence Multispectral מערכת מחוייט המצלמה פותחה באוניברסיטת שפותח במכון הביולוגי הדמיה רפואית (IBMI, האוניברסיטה הטכנית / הלמהולץ Zentrum, מינכן, גרמניה) קרוב בשיתוף עם SurgOptix (SurgOptix Inc, רדווד שורס, קליפורניה, ארה"ב). ההתקנה של מערכת multispectral מצלמה intraoperative הקרינה מוצג באיור 2. האור עובר דרך מערכת של אופטיקה מופרד לתוך האור הנראה, האור הלהקה פליטה (הקרינה) גל אור על הלהקה גל עירור. חבילות אלו מזוהים על ידי ה-CCD מצלמות (CCD) (איור 2). Multi-ספקטרלי אותות ממצלמות כל מעובדים כדי לתקן את הממצאים ואת התשואה נכון כמותי fluorochrome ביו ההפצה. צבע אותות הקרינה ניתן להציג כתמונות נפרדות על גבי צגים חיצוניים או בתמונה אחת. עירור ופליטה המסננים של המצלמה נקבעים בזאת המדידה לאסוף ב 750 ננומטר 800 ± 20 ננומטר, בהתאמה. 2. ניגודיות אופטי הסוכן הכנה הסוכן בניגוד ניאון indocyanine ירוק (ICG, Pulsion AG, מינכן, גרמניה) הוא מוכן בתנאים סטריליים. ריכוז של 0.5 מ"ג / מ"ל ​​משמש. חשוב להשתמש במים מזוקקים סטריליים ולא נתרן כלורי (NaCl), כפי שזו תגרום ICG לצבור. לאחר הכנה, הפתרון חייב להיות מאוחסן במקום חשוך, קריר, כדי למנוע הידרדרות מהירה של עוצמת הקרינה על ידי הלבנה. הערה: מרגע זה והלאה לשמור את ICG מוגן מפני אור. 3. Intraoperative הדמיה – התקנה הזרקת ICG המצלמה ממוקמת ויזם בחדר הניתוחים לפני הניתוח כדי למזער הפרעה ההליך הכירורגי סטנדרטי, קשור high-definition המסכים (2B איור). המצלמה מכוסה בסדינים מעוקרים סטנדרטי (Carl Zeiss Vision BV, Sliedrecht, הולנד, REF OPMI הנח 306,071) על ידי החוקר ב סטרילי או בגדים. הערה: הטיפול נלקח להשתמש רק סוכנים חיטוי ברור, כסוכנים חיטוי צבעוני לעיתים קרובות autofluorescent ועלול להפריע ההליך הדמיה. יתר על כן, וילונות סטרילית סמנים כירורגי יכול להיות autofluorescent. מומלץ לבדוק את כל החומרים המשמשים בשדה או את ההפעלה autofluorescence לפני הניתוח. הסוכן בניגוד ניאון indocyanine ירוק (ICG) הוא מוכן בתנאים סטריליים. ריכוז של 0.5 מ"ג / מ"ל ​​משמש. חשוב להשתמש במים מזוקקים סטריליים ולא NaCl, כפי שזו תגרום ICG לצבור. לאחר הכנה, הפתרון חייב להיות מאוחסן במקום חשוך, קריר, כדי למנוע הידרדרות מהירה של עוצמת הקרינה. הערה: מומלץ לשנות את הכפפות לאחר הכנת ICG, כמו גם כמות קטנה של לשפוך של ICG עלול להשפיע על איכות התמונה. ההליך הדמיה מתחיל לאחר פתיחת הבטן. כאשר שטח של עניין חשוף, המצלמה היא תמרן לתוך שדה הניתוח. הזום ואת המיקוד מותאמים בתנאים סטריליים. אורות בחדר הניתוחים כבויים לגילוי טוב יותר של האות פלואורסצנטי. 1.0 מ"ל של ICG 0.5 מ"ג / מ"ל ​​מעורבב עם 1.0 מ"ל של צבע כחול רגיל (פטנט כחול / בלו patenté, Guerbet, צרפת) מזרק אחד. המנתח מזריק חומר ניגוד על ארבעת הרבעים סביב הגידול הראשוני, מניעת דליפת של הסוכן. הערה: במקרה של דליפת של ICG על כפפות מנתחים, יש צורך לשנות את הכפפות. תמונות סטילס או קטעי וידאו בזמן אמת נרכשים של זרימת הלימפה את המראה של פלורסנט הלימפה הזקיף (איור 3). כל התמונות וסרטי הווידאו נשמרים ישירות על המחשב. מלבד הקרינה, SLN מזוהה גם לפי פרוטוקול סטנדרטי, או באמצעות בדיקה גמא או על ידי בדיקה ויזואלית של צבע כחול, או שניהם. נותב רדיואקטיבי ניתנת בדרך כלל יום אחד לפני הניתוח, ולאחר מכן lymphoscintigram מתבצעת לצורך זיהוי של SLN רדיואקטיבי. זהו חלק בהליך רגיל אין מקום בפרוטוקול דימות פלואורסצנטי. בזמן אמת כריתה של בלוטת הזקיף היא מונחית על ידי שינוי צבע פלואורסצנטי הן וכחול של בלוטות לימפה. התכונה בזמן אמת של המצלמה עוזרת לזהות עבור כל שריד או לגרסאות המגוירות הקרינה הבלתי צפויה של בלוטות ניאון. לאחר כריתה של בלוטת הזקיף, vivo לשעבר תמונות נרכשים של כל בלוטות הלימפה נכרת נוכחות של אות ניאון. זמן החשיפה יכולה להיות ממושכת עבור רזולוציה גבוהה יותר בעת לכידת תמונות סטילס (איור 4). בדיקה Histopathological של בלוטות הלימפה חושף את נוכחותו או היעדרו של תאים סרטניים הצומת בלוטת הזקיף. 4. Representative תוצאות בלוטות הלימפה פלורסנט ניתן לאתר עם יחס אות רקע גבוה. כמו כן, תזרים של ICG דרך כלי הלימפה ניתן לנטר בזמן אמת, המאפשר מיפוי הצומת לימפה. התוצאות עשויות להיות מושפע עומק גדל והולך של הצומת, אולי הדורשים הליכים תאורה שונות כדי להשיג זיהוי. יישום עתידי של הגידול סוכנים ספציפיים פלורסנט ממוקד עשוי לספק זיהוי intraoperative של SLN חיובי עם תאים סרטניים באמצעות טכנולוגיה זו. באיור 1. בלוטת הזקיף (SLN) התיאוריה. SLN היא הצומת first הלימפה לנקז (ים) מן הגידול. איור 2. תמונה סכמטי של מערכת מצלמה multispectral את הקרינה (A). ההגדרה הבסיסית של מערכת המצלמה הניתוח (B). איור 3. דימות פלואורסצנטי Multispectral של לימפה בסרטן בפות. תמונת צבע של לימפה in vivo (A). תמונה פלואורסצנטי של הצומת לימפה אותו, in vivo (B). תמונה Pseudocolor הקרינה על גבי תמונת הצבע (C). איור 4. דימות פלואורסצנטי Multispectral של vivo צומת לשעבר הלימפה סרטן צוואר הרחם. תמונת צבע של קשרי לימפה ex vivo (A). תמונה פלואורסצנטי של הצומת לימפה אותו, לשעבר vivo (B). תמונה Pseudocolor הקרינה על גבי תמונת הצבע (C).