Hücre DışıLaştırıcı Meme Yağ Pedleri: Meme Yağı Pedlerinden Hücre Dışı Matris Hidrojelleri Türetme

Published: April 30, 2023

Abstract

Kaynak: Alves ve ark., Hücre Dışı Matris Hidrojelleri Kullanarak Normal Doku Radyasyon Etkilerinin Incelenmesi. J. Vis. Exp. (2019).

Bu video, in vitro çalışmalar için ex vivo ışınlamayı takiben murine meme yağ pedlerini hücre dışı haleleştirerek hücre dışı matris hidrojelleri türetmenin bir tekniğini açıklamaktadır. Bu hidrojel, tümör hücresi davranışını incelemek için radyasyon sonrası in vivo meme dokusu ortamını taklit etmeye yardımcı olur.

Protocol

1. Hücreden Arındırma NOT: Bu prosedür, DNA’yı verimli bir şekilde çıkarmak için sodyum dodecyl sülfat yerine sodyum deoksikolat iyonik deterjanı içeren yağ desellülerizasyonuna odaklanan daha önce yayınlanan yöntemlerden uyarlanmıştır. 1. günde,donmuş Meme Yağı pedlerini veya MFP’leri -80 °C’den çıkarın ve oda sıcaklığında çözün. Çözdükten sonra, MFP’leri hassas bir görev silme işleminde kıs…

Offenlegungen

The authors have nothing to disclose.

Materials

10% Neutral Buffered Formalin, Cube with Spigot    VWR 16004-128
2-methylbutane   Alfa Aesar 19387
Bovine Serum Albumin   Sigma-Aldrich A1933-25G
Dulbecco's phosphate-buffered saline   Gibco 14040133
Fisher Healthcare Tissue-Plus O.C.T. Compound   Fisher Scientific  23-730-571 cryostat embedding medium
Kimtech Science Kimwipes   Kimberly Clark delicate task wipes
n-Propanol (Peroxide-Free/ Sequencing), Fisher BioReagents   Fisher Scientific BP1130-500
PBS (10X), pH 7.4   Quality Biological, Inc. 119-069-151  Phosphate-buffered saline
Penicillin-Streptomycin   Gibco 15140-122
Peracetic acid  Sigma-Aldrich  77240-100ML
Triton x-100  Sigma-Aldrich  X100-100ML  t-Octylphenoxypolyethoxyethanol
Trypsin-EDTA (0.25%), phenol red   Gibco 25200-056
Richard-Allan Scientific Signature Series Hematoxylin 7211 Richard-Allan Scientific 7211
Whatman qualitative filter paper, Grade 4   Whatman  1004-110 grade 4 qualitative filter paper
Xylenes (Certified ACS), Fisher Chemical   Fisher Scientific X5-5

Play Video

Diesen Artikel zitieren
Decellularizing Mammary Fat Pads: Deriving Extracellular Matrix Hydrogels from Mammary Fat Pads. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20229, doi: (2023).

View Video