Decellularizing רפידות שומן Mammary: נגזרת הידרוג'ל מטריקס חוץ תאיים מרפידות שומן ממרי

Published: April 30, 2023

Abstract

מקור: Alves et. al., לימוד השפעות קרינת רקמות נורמלית באמצעות מטריקס הידרוג’לים חוץ-תאיים.

וידאו זה מתאר טכניקה של נגזרת הידרוג’ל מטריצה חוץ-תאית על ידי decellularizing רפידות שומן mammary מורין בעקבות הקרנת ex vivo למחקרים במבחנה. הידרוג’ל זה מסייע לחקות את סביבת רקמת השד in vivo לאחר הקרינה כדי ללמוד התנהגות תאים סרטניים.

Protocol

1. דקלולריזציה שים לב: הליך זה הותאם משיטות שפורסמו בעבר התמקדו decellularization שומן, שכלל את חומר ניקוי יוני נתרן deoxycholate ולא נתרן דודקיל סולפט כדי להסיר DNA ביעילות. ביום הראשון, להסיר רפידות שומן Mammary קפוא או MFPs מ -80 מעלות צלזיוס ולהפשיר בטמפרטורת החדר.</li…

Offenlegungen

The authors have nothing to disclose.

Materials

10% Neutral Buffered Formalin, Cube with Spigot    VWR 16004-128
2-methylbutane   Alfa Aesar 19387
Bovine Serum Albumin   Sigma-Aldrich A1933-25G
Dulbecco's phosphate-buffered saline   Gibco 14040133
Fisher Healthcare Tissue-Plus O.C.T. Compound   Fisher Scientific  23-730-571 cryostat embedding medium
Kimtech Science Kimwipes   Kimberly Clark delicate task wipes
n-Propanol (Peroxide-Free/ Sequencing), Fisher BioReagents   Fisher Scientific BP1130-500
PBS (10X), pH 7.4   Quality Biological, Inc. 119-069-151  Phosphate-buffered saline
Penicillin-Streptomycin   Gibco 15140-122
Peracetic acid  Sigma-Aldrich  77240-100ML
Triton x-100  Sigma-Aldrich  X100-100ML  t-Octylphenoxypolyethoxyethanol
Trypsin-EDTA (0.25%), phenol red   Gibco 25200-056
Richard-Allan Scientific Signature Series Hematoxylin 7211 Richard-Allan Scientific 7211
Whatman qualitative filter paper, Grade 4   Whatman  1004-110 grade 4 qualitative filter paper
Xylenes (Certified ACS), Fisher Chemical   Fisher Scientific X5-5

Play Video

Diesen Artikel zitieren
Decellularizing Mammary Fat Pads: Deriving Extracellular Matrix Hydrogels from Mammary Fat Pads. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20229, doi: (2023).

View Video