הדור של ממוספרות ראשיות: טכניקה כדי לקבוע את עוצמת התא
Published: April 30, 2023
Abstract
מקור: לומברדו ואח ‘, Mammosphere היווצרות Assay מן הרקמות סרטן השד האנושי וקווי תאים. (2015).
וידאו זה מתאר בידוד תאי גזע סרטניים מקווי תאים סרטניים בשד. אנו תרבות אלה תאי גזע סרטניים כדי ליצור ממוגרפיה ראשונית להערכת התחדשות עצמית וחישוב יעילות יצירת כדור, המאפשר השוואה על פני צפיפויות זריעה שונות.
Protocol
1. דור הממוספרות העיקריות מקווי התאים של סרטן השד האנושי שים לב: בצע את השלבים הבאים מתחת למכסה המנוע של התרבות הסטרילית. הכן מדיה ממוספרית המכילה DMEM/F12 בתוספת 2 מ”מ ל-גלוטמין, 100 U/ml פניצילין, 100 U/ml סטרפטומיצין. הכן מדיה מלאה מיד לפני השימוש על ידי הוספת 20 ננוגרם / מ?…
Offenlegungen
The authors have nothing to disclose.
Materials
| DMEM/F12 | Lonza | CC-3151 | |
| 2 mM L-glutamine | Sigma Aldrich | G8540 | |
| 100 U/ml Penicillin & Streptomycin | Sigma Aldrich | P4083 | |
| 20 ng/ml Recombinant human epidermal growth factor (EGF) | Sigma Aldrich | E9644 | |
| 20 ng/ml Recombinant human basic fibroblast growth factor (bFGF) | R&D systems | 233-FB-025 | |
| 1x B27 supplement | Invitrogen | 17504-044 | |
| Phosphate buffered saline (PBS) | Thermo Scientific | 12399902 | |
| 0.5% trypsin/0.2% EDTA | Sigma Aldrich | 59418C | |
| Fetal calf serum | First Link UK | 02-00-850 | |
| Trypan blue | Sigma Aldrich | 93595 | |
| Low attachment 6-well plates | Corning | CLS3814 |
Diesen Artikel zitieren
Generation of Primary Mammospheres: A Technique to Determine Cell Potency. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20211, doi: (2023).