Cette vidéo décrit l’isolement des cellules souches cancéreuses des lignées de cellules cancéreuses du sein. Nous avons cultivé ces cellules souches cancéreuses pour générer des mammosphères primaires pour évaluer l’auto-renouvellement et calculer l’efficacité de formation de sphère, permettant la comparaison entre différentes densités d’ensemencement.
Protocol
1. Génération de mammosphères primaires à partir de lignées cellulaires du cancer du sein humain REMARQUE: Effectuez les étapes suivantes sous un capot de culture stérile. Préparer Mammosphere Media contenant du DMEM/F12 complété par 2 mM de L-glutamine, 100 U/ml de pénicilline, 100 U/ml de streptomycine. Préparer les supports complets immédiatement avant l’utilisation en ajoutant 20 ng/ml de facteur de croissance épidermique humain recombinant (FEM; …
Offenlegungen
The authors have nothing to disclose.
Materials
DMEM/F12
Lonza
CC-3151
2 mM L-glutamine
Sigma Aldrich
G8540
100 U/ml Penicillin & Streptomycin
Sigma Aldrich
P4083
20 ng/ml Recombinant human epidermal growth factor (EGF)
Sigma Aldrich
E9644
20 ng/ml Recombinant human basic fibroblast growth factor (bFGF)