Fijación de etanol y tinción dapi: un método para visualizar el ADN en C. elegans

Published: April 30, 2023

Abstract

Fuente: Clarke, E. K., et al. Manipulation of Ploidy in Caenorhabditis elegans. J. Vis. (2018).

Aquí, describimos una técnica utilizada para visualizar el ADN genómico en nematodos fijos e intactos. El video incluye un protocolo de ejemplo para contar cromatina en ocitos C. elegans no fertilizados.

Protocol

Este protocolo es un extracto de Clarke et al, Manipulation of Ploidy in Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. (2018). Las cepas tetraploides se pueden validar contando el número de cromosomas en sus ócitos no fertilizados. La microscopía fluorescente se puede utilizar para detectar el número de pares cromosómicos en ocitos diploides no fertilizados (antes de las divis…

Materials

Dissecting Microscope Motic Microscopy SMZ171
Name Company Catalog Number Comments
Staining
Hoechst 33258, Pentahydrate Biotium 40045
DAPI Biotium 40011
Name Company Catalog Number Comments
Ethanol Fixation
Ethanol, Pure, 190 Proof (95%), USP Koptec, VWR 89125-166
Name Company Catalog Number Comments
M9 Buffer
Sodium chloride, Biotechnology Grade VWR 97061-278
Potassium phosphate, Monobasic Anhydrous Grade VWR 97062-346
Sodium phosphate, monobasic dihydrate Fisher Scientific AC271750025

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Diesen Artikel zitieren
Ethanol Fixation and DAPI Staining: A Method to Visualize DNA in C. elegans. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20136, doi: (2023).

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