הליך זה מראה כיצד להשתמש ג'ין Pulser מערכת MXcell electroporation במהירות ובקלות לזהות את התנאים הטובים ביותר עבור electroporation fibroblasts העכבר עובריים (MEFs) או תאים ראשוניים אחרים. שיקולים לפתרון בעיות הם דנו גם וידאו המשויכת.
זה הופך ברור יותר ויותר כי electroporation היא הדרך היעילה ביותר להציג את ה-DNA או פלסמיד siRNA לתוך תאים ראשוניים. Pulser הגן מערכת MXcell electroporation וג'ין Pulser electroporation חיץ (Bio-Rad) פותחו במיוחד בקלות transfect חומצות גרעין לתאי יונקים קשות transfect תאים, כגון תאים ראשוניים גזע. אנו מדגימים כיצד לבצע ניסוי פשוט לזהות במהירות את התנאים electroporation הטוב ביותר. נדגים איך לנהל מספר דוגמאות באמצעות מגוון של תנאים electroporation כך ניסוי ניתן לבצע באותו זמן כמו אופטימיזציה מבוצעת. אנו גם להראות כיצד תנאים אופטימליים מזוהה באמצעות 96-היטב צלחות electroporation ניתן להשתמש cuvettes electroporation סטנדרטי, הקלת לעבור צלחות electroporation כדי cuvettes electroporation תוך שמירה על יעילות electroporation אותו. בסרטון, אנו ידונו גם כמה גורמי מפתח שיכולים להוביל להצלחה או כישלון של ניסויים electroporation.
מאמר זה וידאו מדגים כיצד להשתמש במערכת electroporation MXcell לזהות בקלות electroporation תנאים אופטימליים MEFs או אחר שורות תאים ראשוניים. הפורמט 96-היטב צלחת מאפשר רבים משכפל של תנאי הניסוי או אופטימיזציה להתבצע בו זמנית, אשר יכול לבטל את הצורך בניסויים נפרדים רבים. בעת ביצוע הליך זה, יש לזכור להשתמש בתאים בריאים בהקדם לאחר הבידוד ככל האפשר להשתמש התנאים electroporation כי הם מתאימים למאגר electroporation.
The authors have nothing to disclose.
Material Name | Typ | Company | Catalogue Number | Comment |
---|---|---|---|---|
Gene Pulser® Electroporation Buffer | Bio-Rad Laboratories, Inc. | 165-2676 | ||
Gene Pulser MXcell™ Electroporation System | Bio-Rad Laboratories, Inc. | 165-2670 | ||
Gene Pulser MXcell™ ShockPod™ Cuvette Chamber | Bio-Rad Laboratories, Inc. | 165-2673 | ||
Gene Pulser MXcell™ Electroporation System With ShockPod™ Cuvette Chamber | Bio-Rad Laboratories, Inc. | 165-2674 |