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Análise do Influxo de Cálcio Induzido por Receptores de Células T em Células T Primárias Murinas por Citometria de Fluxo de Espectro Completo
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Analysis of T-cell Receptor-Induced Calcium Influx in Primary Murine T-cells by Full Spectrum Flow Cytometry

Análise do Influxo de Cálcio Induzido por Receptores de Células T em Células T Primárias Murinas por Citometria de Fluxo de Espectro Completo

DOI:
10.3791/64526-v

•

10:01 min

•

December 16, 2022

•

, ,
1Department of Immunology and Microbiology,University of Colorado-Anschutz School of Medicine

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:33Indo-1 Ratiometric Dye and Fluorescent Antibody Labeling
  • 03:35Acquisition of Calcium Influx Using Flow Cytometric Analysis
  • 07:45Results: Visualization of Calcium Responses in Gated Populations of Murine Thymocytes
  • 09:17Conclusion

Summary

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O influxo de cálcio, uma medida da sinalização de células T, é uma maneira eficaz de analisar as respostas à estimulação de receptores de células T. Este protocolo para multiplexação de Indo-1 com painéis de anticorpos direcionados a moléculas de superfície celular aproveita as capacidades altamente flexíveis da citometria de fluxo de espectro completo.

Tags

T-cell ReceptorCalcium InfluxFlow CytometryIndo-1 AMCell StainingCell PhenotypingCell SubsetsEGTAIonomycinFc Receptor BlockingCell WashingMaster Mix Antibody Staining

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