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生物化学
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使用Leginon进行载物台倾斜的单颗粒冷冻电镜数据收集
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生物化学
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生物化学
Single-Particle Cryo-EM Data Collection with Stage Tilt using Leginon
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使用Leginon进行载物台倾斜的单颗粒冷冻电镜数据收集
DOI:
10.3791/64136-v
•
04:52 min
•
July 01, 2022
•
Sriram Aiyer
,
Timothy S. Strutzenberg
,
Marianne E. Bowman
,
Joseph P. Noel
3
,
Dmitry Lyumkis
4,5
1
Laboratory of Genetics
,
The Salk Institute for Biological Studies
,
2
Jack H. Skirball Center for Chemical Biology and Proteomics
,
The Salk Institute for Biological Studies
,
3
Department of Chemistry and Biochemistry
,
University of California San Diego
,
4
Graduate School of Biological Sciences, Section of Molecular Biology
,
University of California San Diego
,
5
Department of Integrative Structural and Computational Biology
,
The Scripps Research Institute
Chapters
00:05
Introduction
00:28
Setting Up the Tilted Data Collection
03:23
Results: Images of the Grid at Square Magnification with Different Tilt Angles and Hole Exposures and 2D Class Averages Collected at Different Tilt Angles
04:27
Conclusion
Summary
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自动翻译
本协议描述了冷冻电镜实验中倾斜单颗粒数据收集的通用且易于实施的方案。对于由于粘附空气-水界面而遭受优先方向偏差的样品,该程序对于获得高质量的EM图特别有用。
Tags
Cryo-EM
Single-particle Analysis
Stage Tilt
Particle Orientation
Data Collection
Eucentric Height
Image Shift
Focus
Hole Finding
Automated Targeting
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