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Sf9精製超加工キネシン-3ファミリーモーターの1分子解析
JoVE 杂志
生物化学
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JoVE 杂志 生物化学
Single-Molecule Analysis of Sf9 Purified Superprocessive Kinesin-3 Family Motors

Sf9精製超加工キネシン-3ファミリーモーターの1分子解析

DOI:

08:16 min

July 27, 2022

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Chapters

  • 00:05Introduction
  • 01:22P0 Virus Stock Generation
  • 02:38P1 Virus Stock Generation and Large-Scale Infection
  • 03:28Sf9 Purification of Kinesin-3 Motors
  • 04:25Microtubule Polymerization and In Vitro Single-Molecule Motility Assay
  • 05:22In Vitro Microtubule Gliding Assay
  • 06:23Results: Analysis of Sf9-Purified Kinesin-3 Motor
  • 07:24Conclusion

Summary

自动翻译

本研究では、キネシン-3ファミリーのメンバーであるKIF1A(1-393LZ)をSf9-バキュロウイルス発現系を用いて精製する。これらの精製モーターの in vitro 単一分子およびマルチモーターグライディング分析は、哺乳類細胞ライセートからのモーターに匹敵する堅牢な運動特性を示しました。したがって、Sf9-バキュロウイルス系は、目的のモータータンパク質を発現および精製するのに適している。

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