Measurement of Protein Turnover Rates in Senescent and Non-Dividing Cultured Cells with Metabolic Labeling and Mass Spectrometry

00:05Introduction
00:58Labeling of Cells Pulsed SILAC and Harvest of Lysates
02:29In-Solution Trypsin Digestion and Sample Clean-Up with Solid-Phase Extraction (SPE)
04:15Data-Dependent Acquisition Mass Spectrometry Analysis and Calculation of Protein Half-Lives
06:31Results: Measurement of Protein Turnover Rates in Senescent and Non-Dividing Cultured Cells Using pSILAC Mass Spectrometry
08:13Conclusion

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यह प्रोटोकॉल स्पंदित SILAC, untargeted मास स्पेक्ट्रोमेट्री विश्लेषण, और प्रोटीन आधे जीवन की एक सुव्यवस्थित गणना के साथ senescent और गैर-विभाजित कोशिकाओं के चयापचय लेबलिंग के लिए वर्कफ़्लो का वर्णन करता है।

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