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Ein massenspektrometriebasierter Ansatz zur Identifizierung von Phosphoproteinphosphatasen und ihren Interaktoren
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JoVE 杂志 生物化学
A Mass Spectrometry-Based Approach to Identify Phosphoprotein Phosphatases and their Interactors
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Ein massenspektrometriebasierter Ansatz zur Identifizierung von Phosphoproteinphosphatasen und ihren Interaktoren

DOI:
10.3791/63805-v

•

10:17 min

•

April 29, 2022

•

,
1Department of Biochemistry and Cell Biology,Geisel School of Medicine at Dartmouth, 2Norris Cotton Cancer Center

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:46Sample Preparation
  • 02:26Preparation of Phosphatase Inhibitor Beads
  • 04:03Washing and Elution of PPPs from the PIBs
  • 05:40Data Analysis
  • 08:30Results: Identification of Specific PIB Binders in HeLa Cells
  • 09:37Conclusion

Summary

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Hier stellen wir ein Protokoll zur Anreicherung von endogenen Phosphoproteinphosphatasen und ihren interagierenden Proteinen aus Zellen und Geweben und deren Identifizierung und Quantifizierung durch massenspektrometriebasierte Proteomik vor.

Tags

Phosphoprotein PhosphatasesPIB-MSMass SpectrometryProteomicsPhosphatase InteractorsCell LysisProtein QuantificationPhosphatase Inhibitor ControlPhosphatase Inhibitor Beads

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