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Ein fluoreszenzbasierter Assay des Membranpotentials zur Hochdurchsatz-Funktionsuntersuchung zweier endogener Ionenkanäle in zwei Epithelzelllinien
JoVE 杂志
生物学
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JoVE 杂志 生物学
A Fluorescence-Based Assay of Membrane Potential for High-Throughput Functional Study of Two Endogenous Ion Channels in Two Epithelial Cell Lines
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Ein fluoreszenzbasierter Assay des Membranpotentials zur Hochdurchsatz-Funktionsuntersuchung zweier endogener Ionenkanäle in zwei Epithelzelllinien

DOI:
10.3791/63528-v

•

06:59 min

•

June 22, 2022

•

, , ,
1Molecular Medicine,Hospital for Sick Children, 2Cell Biology,Hospital for Sick Children, 3Department of Physiology,University of Toronto, 4Department of Paediatrics,University of Toronto, 5Department of Biochemistry,University of Toronto

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:46Cell Plating and Differentiation
  • 02:33CFTR Functional Assay
  • 05:24Results: Measurement of CFTR Channel Activity
  • 06:22Conclusion

Summary

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Dieses Protokoll beschreibt eine Methode zur Untersuchung von elektrogenen Membranproteinen durch Messung von Änderungen des Membranpotentials. Dieser Assay bietet eine Plattform für die funktionelle Auslesung mehrerer Ionenkanäle, die endogen in Epithelzelllinien exprimiert werden.

Tags

Fluorescence-based AssayMembrane PotentialHigh-throughputIon ChannelsEpithelial CellsCalu-3Caco-2Cell CultureTrypsin96-well Plate384-well PlateSodium-free BufferChloride-free BufferNMDG

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