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Espectroscopia de fluorescência de dupla cor para estudar interação proteína-proteína e dinâmica de proteína em células vivas
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JoVE 杂志 生物化学
Dual-Color Fluorescence Cross-Correlation Spectroscopy to Study Protein-Protein Interaction and Protein Dynamics in Live Cells

Espectroscopia de fluorescência de dupla cor para estudar interação proteína-proteína e dinâmica de proteína em células vivas

DOI:
10.3791/62954-v

•

14:12 min

•

December 11, 2021

•

, , , , , ,
1Rudolf Virchow Center for Integrative and Translation Bioimaging,Julius-Maximilian University Wuerzburg, 2Max Delbrück Center for Molecular Medicine, Berlin

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 01:09Sample Preparation
  • 04:34Calibration Measurements
  • 05:58Live Cell Measurements
  • 06:52Data Export
  • 07:23Calibration Measurements
  • 09:20Live Cell Experiments
  • 11:20Results
  • 13:17Conclusion

Summary

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Apresentamos um protocolo experimental e um fluxo de trabalho de análise de dados para realizar espectroscopia de correlação transversal de fluorescência de células vivas (FCCS) combinada com a transferência de energia de ressonância förster (FRET) para estudar a dinâmica do receptor de membrana em células vivas usando técnicas modernas de rotulagem de fluorescência.

Tags

Fluorescence Correlation SpectroscopyCross-correlation SpectroscopyFRETG Protein-coupled ReceptorsBeta-2 Adrenergic ReceptorsSphingolipid ReceptorsProtein-protein InteractionProtein DynamicsLive CellsCell CultureTransfectionSNAP-tagFluorescence AnisotropyTranslational DiffusionRotational Diffusion

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