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生細胞におけるタンパク質相互作用とタンパク質ダイナミクスを研究するための二色蛍光相互相関分光法

JoVE 杂志
生物化学
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JoVE 杂志生物化学

Dual-Color Fluorescence Cross-Correlation Spectroscopy to Study Protein-Protein Interaction and Protein Dynamics in Live Cells

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生細胞におけるタンパク質相互作用とタンパク質ダイナミクスを研究するための二色蛍光相互相関分光法

DOI:

10.3791/62954-v

•

14:12 min

•

December 11, 2021

•

Katherina Hemmen*¹, Susobhan Choudhury*¹, Mike Friedrich, Johannes Balkenhol, Felix Knote, Martin J. Lohse, Katrin G. Heinze

¹Rudolf Virchow Center for Integrative and Translation Bioimaging,Julius-Maximilian University Wuerzburg, ²Max Delbrück Center for Molecular Medicine, Berlin

Chapters

00:05Introduction
01:09Sample Preparation
04:34Calibration Measurements
05:58Live Cell Measurements
06:52Data Export
07:23Calibration Measurements
09:20Live Cell Experiments
11:20Results
13:17Conclusion

Summary

自动翻译

我々は、現代の蛍光標識技術を用いて生細胞における膜受容体ダイナミクスを研究するために、フェルスター共鳴エネルギー伝達(FRET)と組み合わせた生細胞二重色蛍光相互相関分光(FCCS)を行う実験プロトコルとデータ分析ワークフローを提示する。

Tags

Fluorescence Correlation Spectroscopy Cross-correlation Spectroscopy FRET G Protein-coupled Receptors Beta-2 Adrenergic Receptors Sphingolipid Receptors Protein-protein Interaction Protein Dynamics Live Cells Cell Culture Transfection SNAP-tag Fluorescence Anisotropy Translational Diffusion Rotational Diffusion

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