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Einzelmolekül-Fluoreszenz-Energieübertragungsstudie zur Ribosomenproteinsynthese
JoVE 杂志
生物化学
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JoVE 杂志 生物化学
Single Molecule Fluorescence Energy Transfer Study of Ribosome Protein Synthesis
DOI:

08:07 min

July 06, 2021

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:52Preparation of the Ribosome Complexes
  • 01:43Preparation of Sample Slides
  • 03:13Single-Molecule FRET Imaging
  • 06:24Results: Single-Molecule Fluorescence Energy Transfer of Ribosome Protein Synthesis
  • 07:16Conclusion

Summary

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Der Einzelmolekül-Fluoreszenz-Energietransfer ist eine Methode, die die tRNA-Dynamik während der ribosomalen Proteinsynthese verfolgt. Durch die Verfolgung einzelner Ribosomen werden inhomogene Populationen identifiziert, die Aufschluss über Mechanismen geben. Diese Methode kann verwendet werden, um biologische Konformationsänderungen im Allgemeinen zu verfolgen, um dynamische Funktionsbeziehungen in vielen anderen komplexen Biosystemen aufzudecken. Einzelmolekülmethoden können nicht-ratenlimitierende Schritte und dünn besiedelte Schlüsselzwischenprodukte beobachten, die mit herkömmlichen Ensemblemethoden aufgrund des durchschnittlichen Effekts nicht zugänglich sind.

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