Journal
/
生物化学
/
Udnyttelse af tidsforelt protein-induceret fluorescensforbedring til at identificere stabile lokale konformationer En α-Synuclein Monomer ad gangen
JoVE 杂志
生物化学
需要订阅 JoVE 才能查看此.  登录或开始免费试用。
JoVE 杂志 生物化学
Utilizing Time-Resolved Protein-Induced Fluorescence Enhancement to Identify Stable Local Conformations One α-Synuclein Monomer at a Time

Udnyttelse af tidsforelt protein-induceret fluorescensforbedring til at identificere stabile lokale konformationer En α-Synuclein Monomer ad gangen

DOI:
10.3791/62655-v

•

07:56 min

•

May 30, 2021

•

,
1Department of Biological Chemistry, The Alexander Silberman Institute of Life Sciences, Faculty of Mathematics & Science, The Edmond J. Safra Campus,The Hebrew University of Jerusalem, 2The Center for Nanoscience and Nanotechnology,The Hebrew University of Jerusalem

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:48Single-Molecule Protein-Induced Fluorescence Enhancement (smPIFE) Sample Preparation and Data Acquisition
  • 02:19smPIFE Burst Analysis
  • 05:07Results: Estimation of Mean Fluorescence Lifetime and Burst Recurrence Analysis
  • 07:12Conclusion

Summary

自动翻译

自动翻译

Tidsforeltigt proteininduceret fluorescensforbedring med et enkeltmolekyle er en nyttig fluorescensspektspekter, der er følsom over for lokale strukturelle ændringer i proteiner. Her viser vi, at det kan bruges til at afdække stabile lokale konformationer i α-Synuclein, som ellers er kendt som kugleformet ustruktureret og ustabil, når den måles ved hjælp af den længere rækkevidde FRET lineal.

Tags

Keywords: Time-resolvedProtein-induced Fluorescence EnhancementSingle-moleculeAlpha-synucleinStructural SubpopulationsLocal ConformationsSulfo-Cy3BSAWater Immersion ObjectiveLaser FocusPhoton DetectionFRETBurstsPhoton-HDF5

Article

Embed

添加到播放列表

Usage Statistics

Related Videos

check_url/cn/62655?article_type=v

Udnytte den Ethylen-frigivende forbindelse, 2-Chloroethylphosphonic Acid, som værktøj til at studere Ethylen Respons Bacteria
check_url/cn/62655?article_type=v

Time-løst elektrosprayioniserings Brint-deuterium Exchange-massespektrometri til at studere proteiners struktur og Dynamics
check_url/cn/62655?article_type=v

Udnytte en omfattende Immunoprecipitation berigelse System for at identificere en endogen posttranslationel modifikation profil for Target proteiner
check_url/cn/62655?article_type=v

Generation af indfødte, ukodede Huntingtin Exon1 monomere og fibriller ved hjælp af en SUMO Fusion strategi
check_url/cn/62655?article_type=v

Manipulere levende celler til at konstruere stabil 3D cellulære forsamling uden kunstige stillads
check_url/cn/62655?article_type=v

Et fluorescens udsving spektroskopi Assay af Protein-Protein interaktioner på celle-celle kontakter
check_url/cn/62655?article_type=v

Bruger i Vitro fluorescens resonans energioverførsel at studere dynamikken i proteinkomplekser på en millisekund tidsskala
check_url/cn/62655?article_type=v

En strategi til identificering af forbindelser, der påvirker cellevækst og overlevelse i dyrkede pattedyrceller ved lav til moderat gennemløb
check_url/cn/62655?article_type=v

Hurtig gitterforberedelse til tidstilslutt kryo-elektronmikroskopi
check_url/cn/62655?article_type=v

Tidsopløste Förster Resonans Energy Transfer Assays til måling af endogene fosforylerede STAT-proteiner i humane celler

Read Article