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利用时间分辨蛋白诱导的荧光增强来鉴定稳定的局部构象，一次一α-突触核蛋白单体

JoVE 杂志
生物化学

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JoVE 杂志生物化学

Utilizing Time-Resolved Protein-Induced Fluorescence Enhancement to Identify Stable Local Conformations One α-Synuclein Monomer at a Time

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利用时间分辨蛋白诱导的荧光增强来鉴定稳定的局部构象，一次一α-突触核蛋白单体

DOI:

10.3791/62655-v

•

07:56 min

•

May 30, 2021

•

Sofia Zaer, Eitan Lerner²

¹Department of Biological Chemistry, The Alexander Silberman Institute of Life Sciences, Faculty of Mathematics & Science, The Edmond J. Safra Campus,The Hebrew University of Jerusalem, ²The Center for Nanoscience and Nanotechnology,The Hebrew University of Jerusalem

Chapters

00:05Introduction
00:48Single-Molecule Protein-Induced Fluorescence Enhancement (smPIFE) Sample Preparation and Data Acquisition
02:19smPIFE Burst Analysis
05:07Results: Estimation of Mean Fluorescence Lifetime and Burst Recurrence Analysis
07:12Conclusion

Summary

自动翻译

时间分辨单分子蛋白诱导的荧光增强是一种有用的荧光光谱接近传感器，对蛋白质的局部结构变化敏感。在这里，我们展示了它可用于揭示α-突触核蛋白中稳定的局部构象，当使用较长距离的FRET标尺测量时，这也称为球状非结构化和不稳定。

Tags

Keywords: Time-resolved Protein-induced Fluorescence Enhancement Single-molecule Alpha-synuclein Structural Subpopulations Local Conformations Sulfo-Cy3 BSA Water Immersion Objective Laser Focus Photon Detection FRETBursts Photon-HDF5

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