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Produção Livre de Células de Proteolipossomas para Análise Funcional e Desenvolvimento de Anticorpos Visando Proteínas de Membrana
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JoVE 杂志 生物化学
Cell-Free Production of Proteoliposomes for Functional Analysis and Antibody Development Targeting Membrane Proteins

Produção Livre de Células de Proteolipossomas para Análise Funcional e Desenvolvimento de Anticorpos Visando Proteínas de Membrana

DOI:
10.3791/61871-v

•

08:46 min

•

September 22, 2020

•

,
1Graduate School of Medicine,Ehime University, 2Proteo-Science Center,Ehime University

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:38In Vitro Transcription
  • 01:12Translation Material Preparation
  • 01:54Liposome Preparation
  • 03:07In Vitro Translation
  • 05:14Proteoliposome Purification
  • 05:56Sodium Dodecyl Sulfate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis (SDS-PAGE) and Coomassie Brilliant Blue (CBB) Staining
  • 06:57Results: Representative Proteoliposome Production by Bilayer-Dialysis
  • 08:01Conclusion

Summary

自动翻译

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Este protocolo descreve um método eficiente livre de células para a produção de proteolipossomo de alta qualidade pelo método de diálise de duas camadas usando sistema livre de células de trigo e lipossomas. Este método fornece meios adequados para a análise funcional de proteínas de membrana, triagem de alvos de drogas e desenvolvimento de anticorpos.

Tags

Cell-free ProductionProteoliposomesMembrane ProteinsDrug DiscoveryIn-vitro Protein SynthesisLiposome PreparationWheat Germ ExtractTranscriptionTranslationCell-free Expression

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