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Técnicas de microinjeção de embriões para mutagênese específica do local eficiente em Culex quinquefasciatus
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Embryo Microinjection Techniques for Efficient Site-Specific Mutagenesis in Culex quinquefasciatus

Técnicas de microinjeção de embriões para mutagênese específica do local eficiente em Culex quinquefasciatus

DOI:
10.3791/61375-v

•

05:59 min

•

May 24, 2020

•

, , , ,
1Section of Cell and Developmental Biology,University of California, San Diego, 2Department of Entomology and Plant Patholog,Auburn University, 3Tata Institute for Genetics and Society,University of California, San Diego

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:51Alignment of C. quinquefasciatus Pre-blastoderm Stage Embryos
  • 01:46Embryo Microinjection
  • 03:32Embryo Recovery and Hatching
  • 04:08Results: Survival and Mutation Rates of Embryos Injected with Single and Multiplexed gRNAs Targeting White
  • 05:25Conclusion

Summary

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Este protocolo descreve procedimentos de microinjeção para embriões culex quinquefasciatus que são otimizados para trabalhar com ferramentas de edição de genes CRISPR/Cas9. Esta técnica pode gerar eficientemente mutações de germes específicas, hereditárias e germinais que podem ser usadas para a construção de tecnologias genéticas neste vetor de doença subestudado.

Tags

Embryo MicroinjectionCulex QuinquefasciatusSite-specific MutagenesisEgg Raft SeparationHalocarbon OilNeedle PullingMicroinjection ProtocolGenetic ToolsVector ControlGene Function Study

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