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シームレスなゲノム編集によるヒト多能性幹細胞への点突然変異の導入
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遗传学
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JoVE 杂志 遗传学
Introducing Point Mutations into Human Pluripotent Stem Cells Using Seamless Genome Editing
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シームレスなゲノム編集によるヒト多能性幹細胞への点突然変異の導入

DOI:
10.3791/61152-v

•

09:03 min

•

May 10, 2020

•

, ,
1MRC Centre for Regenerative Medicine,University of Edinburgh

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:40Gene Editing of Human Pluripotent Stem Cells
  • 06:57Results: Genetic Editing in Human Pluripotent Stem Cells
  • 08:06Conclusion

Summary

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ここで、 piggyBacベースのドナープラスミドとCas9ニッカーゼ変異体を用いたヒト多能性幹細胞におけるシームレスな遺伝子編集のための詳細な方法について述べる。ヒト胚性幹細胞(hESC)の肝細胞核因子4α(HNF4α)遺伝子座のエクソン8に2点変異を導入した。

Tags

Human Pluripotent Stem CellsGenome EditingCRISPR-Cas9Seamless Genome EditingTargeted Gene InsertionLaminin 521MTeSR1 MediumCell DissociationNucleofectionSingle Guide RNATargeting Vector

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