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Aislamiento, secuenciación y análisis de microRNA extracelular de las células madre mesenquimales humanas
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JoVE 杂志 遗传学
Isolating, Sequencing and Analyzing Extracellular MicroRNAs from Human Mesenchymal Stem Cells
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Aislamiento, secuenciación y análisis de microRNA extracelular de las células madre mesenquimales humanas

DOI:
10.3791/58655-v

•

10:55 min

•

March 08, 2019

•

, , , , ,
1The Interdisciplinary Nanoscience Centre,Aarhus University, 2Department of Molecular Biology and Genetics,Aarhus University

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:33Cell Culture, and the Collection of EVs and RNA-associated Biomolecules
  • 02:54RNA Extraction and Quality Control
  • 04:20Library Construction and Quality Control
  • 09:04Results: Collecting exRNA from hMSC for Next Generation Sequencing
  • 10:31Conclusion

Summary

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Este protocolo muestra cómo purificar microRNAs extracelulares de medios de cultivo celular para la construcción de biblioteca de RNA pequeño y secuencia de la generación siguiente. Varios puestos de control de calidad se describen para permitir a los lectores a entender qué esperar cuando trabajan con baja entradas muestras como exRNAs.

Tags

Extracellular MicroRNAsMesenchymal Stem CellsNext-generation SequencingExtracellular VesiclesRNA IsolationNanoparticle Tracking AnalysisUltracentrifugationQuality Control

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