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JoVE 杂志 免疫与感染
Generation of Knock-out Primary and Expanded Human NK Cells Using Cas9 Ribonucleoproteins

Geração de células NK humana primárias e expandida de Knock-out usando ribonucleoproteínas Cas9

DOI:
10.3791/58237-v

•

07:20 min

•

June 14, 2018

•

, , , , , , , , , , , ,
1Center for Childhood Cancer and Blood Disease,Nationwide Children’s Hospital, 2Nuffield Division of Clinical Laboratory Sciences, Radcliffe Department of Medicine,University of Oxford, 3Center for Clinical and Translational Research,Nationwide Children’s Hospital Research Institute

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:44Human Primary and Expanded Natural Killer (NK) Cell Transduction
  • 04:48Results: Representative Electroporation Efficiency
  • 06:13Conclusion

Summary

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Aqui, apresentamos um protocolo para modificar geneticamente as células assassinas naturais humano primário ou expandido (NK) usando Cas9 ribonucleoproteínas (Cas9/RNPs). Usando este protocolo, geramos humanas células NK deficientes para transformar o receptor 2 do fator de crescimento – b (TGFBR2) e hipoxantina Fosforibosiltransferase 1 (HPRT1).

Tags

Cas9 RibonucleoproteinsNK CellsGene KnockoutPrimary NK CellsExpanded NK CellsCRISPR RNATracrRNAElectroporationTransductionImmunotherapySolid TumorsBrain TumorsTGF-beta

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