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Isolierung von Mastzellen Bauchfell abgeleitet und deren funktionelle Charakterisierung mit Ca2 +-imaging und Degranulation Assays
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JoVE 杂志 免疫与感染
Isolation of Peritoneum-derived Mast Cells and Their Functional Characterization with Ca2+-imaging and Degranulation Assays
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Isolierung von Mastzellen Bauchfell abgeleitet und deren funktionelle Charakterisierung mit Ca2 +-imaging und Degranulation Assays

DOI:
10.3791/57222-v

•

11:31 min

•

July 04, 2018

•

, , ,
1Institute of Pharmacology,Ruprecht-Karls Heidelberg University

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:38PMC Isolation and Cultivation by Intraperitoneal Lavage
  • 03:14Fluorometric Intracellular Free Calcium Concentration Measurement in PMCs
  • 06:38Beta-hexosaminidase Release Measurement in PMCs
  • 08:46Results: Beta-hexosaminidase Release Colorimetric Multi-well Measurements Performed with PMCs Isolated from Wild Type Mice
  • 10:14Conclusion

Summary

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Hier präsentieren wir Ihnen ein Protokoll zu isolieren und kultivieren murinen peritonealen Mastzellen. Wir beschreiben auch zwei Protokolle für ihre funktionelle Charakterisierung: eine fluoreszierende Imaging der intrazellulären freien Ca2 + Konzentration und eine Degranulation Assay anhand der kolorimetrischen Quantifizierung der veröffentlichten β-Hexosaminidase.

Tags

PeritoneumMast CellsCalcium ImagingDegranulationIntracellular SignalingExcitable CellsIon ChannelsImmune Cell ActivationMediator ReleaseFura-2RPMI MediumPeritoneal CavityCell SuspensionIL-3SCFIgE Receptors

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