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免疫与感染
/
在
大肠杆菌
中生成特异的乙酰蛋白的简易协议
JoVE 杂志
免疫与感染
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JoVE 杂志
免疫与感染
A Facile Protocol to Generate Site-Specifically Acetylated Proteins in
Escherichia Coli
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在
大肠杆菌
中生成特异的乙酰蛋白的简易协议
DOI:
10.3791/57061-v
•
11:08 min
•
December 09, 2017
•
Sumana Venkat
2
,
Caroline Gregory
,
Kexin Meng
,
Qinglei Gan
,
Chenguang Fan
2
1
Department of Chemistry and Biochemistry
,
University of Arkansas
,
2
Cell and Molecular Biology Program
,
University of Arkansas
,
3
Department of Biological Sciences
,
University of Arkansas
,
4
Fayetteville High School
Chapters
00:00
Title
00:09
Introduction
01:03
Protocol
01:07
Introducing the Stop Codon into the Target Gene
02:58
Expressing and Purifying Site-specifically Acetylated Protein
06:21
Biochemically Characterizing Acetylated Protein
09:39
Results
10:37
Summary
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基因编码扩展是研究广泛的生物过程, 包括蛋白质乙酰化的有力工具。在这里, 我们演示了一个轻便的协议, 利用这种技术, 在特定的地点, 在
大肠杆菌
细胞生成均匀乙酰蛋白。
Tags
Site-specific Acetylation
Protein Acetylation
Genetic Code Expansion
Pyrrolysyl-tRNA Synthetase
Amber Stop Codon
E. Coli Expression
Site-directed Mutagenesis
Acetyllysine Incorporation
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