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Uso de Immunolabeling para analisar os microtúbulos estáveis, dinâmicos e emergentes no embrião Zebrafish
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JoVE 杂志 发育生物学
Use of Immunolabeling to Analyze Stable, Dynamic, and Nascent Microtubules in the Zebrafish Embryo

Uso de Immunolabeling para analisar os microtúbulos estáveis, dinâmicos e emergentes no embrião Zebrafish

DOI:
10.3791/55792-v

•

12:38 min

•

September 20, 2017

•

, , , ,
1Department of Biological Sciences,University of Maryland, Baltimore County

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:45Fixation of Staged Embryos
  • 01:52Sectioning for Immunolabeling
  • 04:04Confocal Imaging
  • 05:17Quantifying Microtubules
  • 07:10De Novo MT Assembly Assay
  • 09:05Depolymerize Existing MTs
  • 10:26Results: Analysis of Stable, Dynamic, and Nascent Microtubules in the Zebrafish Embryo
  • 12:00Conclusion

Summary

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Immunolabeling métodos para analisar populações distintas de microtúbulos no cérebro em desenvolvimento zebrafish são descritos aqui, que são amplamente aplicáveis a outros tecidos. O primeiro protocolo descreve um método otimizado para immunolabeling estável e dinâmica de microtúbulos. O segundo protocolo fornece um método para a imagem e quantificar microtúbulos nascentes especificamente.

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Keywords: ImmunolabelingMicrotubulesZebrafish EmbryoDevelopmental NeurobiologyCell PolarityStable MicrotubulesDynamic MicrotubulesNascent MicrotubulesFixationSectioningImmunostainingPrimary AntibodiesSecondary AntibodiesDAPI

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