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发育生物学
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광 변환 한 후 형광 붕괴를 사용하여 생활 Zebrafish의 태아의 단백질 안정성을 측정 (FDAP)
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发育生物学
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JoVE 杂志 发育生物学
Measuring Protein Stability in Living Zebrafish Embryos Using Fluorescence Decay After Photoconversion (FDAP)
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광 변환 한 후 형광 붕괴를 사용하여 생활 Zebrafish의 태아의 단백질 안정성을 측정 (FDAP)

DOI:
10.3791/52266-v

•

09:45 min

•

January 28, 2015

•

, , ,
1Department of Molecular and Cellular Biology,Harvard University, 2Systems Biology of Development Group,Friedrich Miescher Laboratory of the Max Planck Society

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:27Generating a Photoconvertible Fusion Construct and Injecting Dechorionated Zebrafish Embryos
  • 03:22Mounting Zebrafish Embryos for Photoconversion and Confocal Imaging
  • 04:37Photoconverting and Measuring the Decrease of the Photoconverted Signal
  • 06:47Analyzing the Data Using PyFDAP
  • 08:18Results: Half-life of Squint-Dendra2 as Determined by Fluorescence Decay After Photoconversion during Embryogenesis
  • 09:19Conclusion

Summary

自动翻译

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세포와 조직에서 단백질 수준은 종종 단단히 단백질 생산 및 통관의 균형에 의해 조절된다. 광 (FDAP) 후 형광 감쇄를 사용하면, 단백질의 클리어런스 동력학 실험적 생체 내에서 측정 할 수있다.

Tags

Protein StabilityFluorescence Decay After PhotoconversionFDAPProtein Clearance KineticsPhotoconvertible Fluorescent ProteinZebrafish EmbryosCompartmental AnalysisIntra- And Extracellular Half-livesSecreted Signaling ProteinsIn Vivo Protein Dynamics

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